卵园细胞的生物学特征及其及肝癌发生相关关系的分析.pdfVIP

卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生相关关系的研究 卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生 相关关系的研究 专 业： 病理学 硕士研究生： 陈琼荣 导 师： 赵国强教授 摘 要 卵圆细胞最初是在1944年由opie在大鼠诱发肝癌的过程中发现的。1956 年首次由Farber将其命名为卵圆细胞。卵圆细胞不仅存在于动物体内，也存在 于人体肝脏。由于卵圆细胞发现于化学诱癌过程，且经常出现在肝脏慢性疾病 或肝脏严重损伤的情况下，因此引起了人们的高度关注，人们对卵圆细胞的研 究热情也随之不断升温。近年的研究表明，卵圆细胞具有干细胞的特征，可以 向肝细胞和胆管上皮细胞分化。现在人们比较倾向于认为，卵圆细胞就是存在 于肝内的干细胞，卵圆细胞的出现可能与肝损伤的修复机制有关。 关于肝癌发生的细胞起源问题，主要存在两种不同的学说。一种认为肝癌 是由分化成熟的肝细胞去分化而成，这是关于肝癌发生的比较经典的理论。另 一种是关于肝癌发生的干细胞学说，即认为肝癌是由肝内的干细胞异常分化而 致。近来有越来越多的证据支持后一学说。由于卵圆细胞最初是在大鼠肝癌模 型中发现的，很自然被认为是肝癌的始动细胞。卵圆细胞与肝癌发生的关系也 就成了研究的一个热点。 长期以来，人们使用不同的方法、从不同的角度展开对卵圆细胞的研究， 使得我们今天对卵圆细胞有了一个比较全面的认识。但随着研究的不断深入， 人们发现卵圆细胞的复杂程度远远超出我们的想象。卵圆细胞从何处来?向何 处去?卵圆细胞基本的分子表达特征是什么?卵圆细胞与肝癌的发生究竟有什 么关系?这一系列的问题一直都还在困惑着我们。但有一点是肯定的，即卵圆 卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生相关关系的研究 细胞在肝脏损伤的修复以及肝癌的发生过程中扮演着重要角色。假如我们能够 寻找一条途径，能够动态地观察卵圆细胞生物学特征、能够连续地观察卵圆细 胞在肝癌发生过程中的演变规律，或许能够找出上述问题的有关答案。这些问 题的深入探讨，不仅有助于我们全面了解卵圆细胞的生物学特征，也将进一步 丰富肝癌发生的基本理论，为将来探讨肝癌新的诊治方法提供理论依据。 为深入探讨上述问题，我们设计了本实验。 目的：试图通过动态的方法观察卵圆细胞的主要生物学特征及其在肝癌发生过 程中的演变规律。 方法：通过构建实验性肝癌模型和卵圆细胞株连续传代的方法建立动态的观察 体系。运用常规旺染色、免疫组织／细胞化学、酶细胞化学、粘液染色和RT．PCR 等技术，揭示卵圆细胞在肝癌发生过程中以及在连续传代过程中的演变规律和 分子表达特征。 结果：1)实验性肝癌模型不同阶段有着不同的形态特征。随着诱癌时间的延长， 逐渐出现卵圆细胞增生，到第14周时达高峰，并出现癌前病变和胆管细胞癌； 之后增生的卵圆细胞逐渐减少，而癌灶不断扩大，到第24周时形成大片的混合 性肝癌。2)0v_6标识出卵圆细胞在实验性肝癌模型中的行踪。3)卵圆细胞表 志L—PK、A1blllnill。 结论：1)以3，一Me—DAB为诱癌剂构建的实验性肝癌动物模型，很好的模拟了 从卵圆细胞增生到肝癌发生、发展的自然进程，形态学特征明显，有助于癌变 过程的动态研究。2)以0V一6作为卵圆细胞的示踪标记，很直观地说明了卵圆 细胞出现、增生及演变规律，与实验性肝癌发生的过程相吻合，提示肝癌的发 生与卵圆细胞的异常分化有关。3)GsT—P和M2一PK在卵圆细胞株OC3各代内的 表达与骨髓干细胞向肝细胞诱导分化的中间阶段(幼稚肝细胞阶段)的分子表 达特征极为相似，加上肝癌动物模型中c—Kit的阳性表达，均提示卵圆细胞和 骨髓干细胞之间可能存在某种渊源联系。4)卵圆细胞同时表达AFP和GGT，兼 肝细胞和胆管上皮细胞的分子表达特征于一身，提示卵圆细胞具有向肝细胞和 Oc3内从29代到79代持续表达，可作为卵圆细胞的基本分子标志。 Ⅱ 卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生相关关系的研究 关键词： 卵圆细胞， 生物学特征， 骨髓干细胞， 肝癌