Survivin在脑星形细胞瘤中表达的意义及其与p16关系的研究.pdfVIP

望型查堂墼兰!墨堡!．!：堡堕兰 !!!!!·!鱼堕’^形细胞瘤中表达的意义及托与p16芙系的研究 Survivin在脑星形细胞瘤中表达的意义及其与p16关系的研究 浙江大学医学院 外科学(神经外科) 2001级硕士研究生 刘凡隆 导 师 詹仁雅主任医师 周永庆主任医师 摘 要 研究目的 细胞凋亡的抑制与恶性肿瘤的发生发展以及对化疗、放疗不敏感有密切关系。 Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基[](i11|hibitor ofapoptosis，IAP)，以周期调岢的方 式选择性地表达于细胞周期的G2／M期，具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的功能。 1期重要的负调节 p16基阗又称多肿瘤抑制基因，直接参与细胞周期的调节，是细胞G 蛋白。为了探索脑星形细胞瘤基因变异在发病中的意义，进而寻找有效的治疗方法， 本研究利用sP免疫组化方法检测人脑星形细胞瘤Survivin及p16的表达，并对其表达 与星形细胞瘤的病理学形态、组织学分级和患者年龄、性别之问的关系进行分析，讨 展中的作用，为临床治疗星形细胞瘤提供新的思路。 材料与方法 L标本来源及准备：选用浙江大学医学院附属第一医院1999年8月到2003年10 月神经外科手术切除并经病理检查证实的旱形细胞瘤标本56例，其中男性3l例，女 性25例，年龄4～84岁，平均年龄39．7岁。所有患者术前均未接受过放化疗。星形 细胞瘤标本根据Kemohan分级法进行分级，分为I级9例、II级20例、ⅡI级17例、 Ⅳ级lO例。对照组为正常脑组织7例，标本取自同期颅脑外伤患者内减压术。 5uill)，行HE和免 2．免疫组化染色：肿瘤组织经常规石蜡包埋后连续切片(厚4 2 塑生堂堂堕塑土堂生堕兰 Survivln存腑jd形细胞瘤rrl表达的愈义厦其与p16哭系的研究 疫组织化学法染色(SP法)。抗体为兔抗人Survi vin多抗(1：150)及兔抗人口16多 抗(1：150)。免疫组化染色sP试剂盒，按其操作说明书进行染色。以已知特异性的 阳性病例乳腺癌标本作为Survivin及p16阳性对照，以P／3S缓冲液代替一抗作阴性对 照。 Survivin刖性为细胞浆呈棕黄色或棕褐色，p16阳性为细胞核和细胞浆着棕褐色或 棕黄色，染色结果综合染色强度及阳性细胞数量两个方面进行结果判定。染色强度判 定：阴性(0分)，染色弱但明显高于阴性对照(1分)，染色清晰(2分)，染色强(3 分)。阳性细胞数量判定：选染色均匀的区域，在400倍视野下计数着色细胞占视野细 胞总数的百分数，共计数5个视野，取平均值。每例标本按阳性细胞所占百分比评分 and 50％(2分)，阳性细胞数50％(3分)。记分标准参照Remmele Stegnerde的半定 量记数方法，即根据染色强度、阳性细胞数和两者记分的乘积进行判断，依次为阴性 关系数以“表示。本实验所有数据均用SAS(6．12版)软件包完成统计。 结 果 Survivin的阳性表达强度逐渐增高，有显著差异(x2。。f17．3285，P0．01)。 本组止常脑组织中p16刚性表达率为100％。随着星形细胞瘤病理级别的增高，p16 兰堕!苎堂堡竺堡燮堡堡苎