不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究.pdfVIP

检测分析 30 锈纠广函2008年第21期 — — — — — — — 一 — — — — — — — — — — — — … — D Ⅲi，，r ?dIml，／1i 不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究 杨奇慧 舒 璐 钟剑锋 摘 要 ：用滴定法和增值法测定大豆粉在 85℃和 究 ．以比较不 同方法对测定结果 的影响，为实际 140~C下分别热处理 O、45、90、135、180min的脲酶活性 ，并 生产和理论研究提供依据和参考 。 用 0．2％KOH溶解法测定大豆粉在不 同热处理下的蛋 白 质溶解度 结果表明：在 85℃条件下．处理 0180min大豆 1材料和方法 粉的脲酶活性和蛋 白质溶解度随着时间延长无明显变化 ： 1．1 实验材料 而在 140~(2条件下．大豆粉的脲酶活性和蛋 白质溶解度随 大豆粉 ：将生大豆粉碎 ，过 60目标准筛。在 着处理时间的延长显著降低 通过测定结果可见，同一样 85qC和 140~C下分别处理0、45、90、135和 180min 品用滴定法和增值法测得 的脲酶活性在数值上不相等 ．不 能互用 ．但蛋 白质溶解度更能反映大豆粉受热过度的程 冷却后装入封口袋保存备用 度。 1．2 化学试剂 关键词 ：大豆粉 ；脲酶活性 ；蛋 白质溶解度 ；pH增值 本实验所用试剂均为分析纯 (AR)．实验用水 法 ：滴定法 为蒸馏水 1．3 测 定方法 众所周知 ，大豆含有较丰富的蛋 白质 、脂肪 、 1．3．1DH增值法 碳水化合物等 ．是饲料生产中主要 的植物蛋 白质 实验原理 ：将研细的试样与尿素缓冲液混 源之一．具有较高营养价值。但是，大豆中含有多 合，尿素在尿素酶作J1JF水解产生氨，使溶液pH 种抗营养 因子 ，如蛋 白酶抑制 因子、植物凝集素 、 值改变 ．改变的程度与脲脚活性大小相关 ．因此 胃肠胀气 因子、抗维生素因子 、抗原蛋 白等 ，这些 可以用其与空 白溶液的差值表示脲酶活性高低 ． 抗营养因子阻碍营养物质在动物体内的利用 ．尤 单位为ApH值 其是胰蛋 白酶抑制因子的存在不仅会降低饲料 (1)主要溶液配制 营养成分的消化率和适 口性．而且也会影响动物 磷酸缓冲液 ：将 3．403g磷酸二氢钾加入 对蛋 白质的消化吸收．对动物生长发育也产生不 100mL水 中溶解 ：将 4．335g磷酸氢二钾溶于 100 良的影响 但是 ，胰蛋 白酶抑制 因子 的测定较困 mL水中：将两种溶液混合 ，稀释至 1000mL。用 难 ．而豆粕 中脲酶活性与胰蛋白酶抑制因子活性 弱酸或弱碱调至 pH=7．0。 呈正相关 ．所 以通常通过测定脲酶活性来反映蛋 尿素缓冲液：将 15g