大孔树脂AB8动态吸附黄柏总生物碱的工艺研究.docVIP

　　大孔树脂AB8动态吸附黄柏总生物碱的工艺研究 【摘要】 【目的】考察大孔树脂AB8对黄柏总生物碱动态吸附和解吸的最佳工艺条件。【方法】采用AB8树脂对黄柏提取液中总生物碱进行动态吸附,以总生物碱的吸附量或解吸量为指标,分别考察了上样量、流速、杂质洗脱剂水的用量、洗脱剂的浓度和用量。【结果】动态吸附的较佳工艺条件为：每mL树脂上样50 mL样品,上柱流速20 mL(2个柱体积)/h,杂质洗脱剂水的用量为30 mL(3个柱体积),洗脱剂采用体积分数40%的乙醇,用量为60 mL(6个柱体积),在此工艺条件下操作,得到总生物碱的纯度为4006%,比上柱之前的纯度提高了256倍。【结论】该法简便易行，纯化效果好。 【关键词】 黄柏/化学;总生物碱/分析;大孔树脂;动态吸附;分光光度法，紫外线 黄柏为芸香科植物黄檗(关黄柏)Phelledendron amurense Rupr.或黄皮树(川黄柏) Phelledendron chinense Schneid.的干燥树皮。树皮中含有小檗碱(berberine)、木兰花碱(magnoflorine)、黄柏碱(phellodendrine)等多种生物碱及内酯、甾醇等,其中以小檗碱为主要药效成分[1]。目前对黄柏药材中总生物碱的提取分离纯化和含量测定研究较多,提取方法有超声—酶法提取[2]、醇提[3]、碱提[4],分离纯化方法有高速逆流色谱法[5]、离子交换法[6]、大孔树脂吸附[7]等,其中大孔树脂吸附技术用于黄柏提取液的分离纯化主要集中在静态吸附研究方面,动态吸附研究尚未见报道。本实验对大孔树脂动态吸附黄柏总生物碱的工艺进行研究,旨在为工业化生产提供参考。现将结果报道如下。 　　1仪器与材料 　　UVmini1240紫外分光光度计(日本岛津)，AB8树脂(天津欧瑞生物科技有限公司)。黄柏(广东健泽药业有限公司,生产批号：081201,经广州中医药大学中药鉴定教研室黄海波老师鉴定为关黄柏Phelledendron amurense Rupr.的干燥树皮)。 　　2方法与结果 　　21总生物碱的含量测定方法 　　211标准曲线的制备 　　2111检测波长的确定分别吸取盐酸小檗碱标准品溶液和经适当稀释后的黄柏提取液,在200～600 nm之间进行波长扫描,两者在265 nm波长处呈现共有吸收峰,故确定检测波长为265 nm。见图1。 　　2112标准曲线的绘制精密称取干燥至恒质量的盐酸小檗碱对照品111 mg,置50 mL量瓶中,用01 mol/L HCl溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。准确量取盐酸小檗碱标准品溶液02、04、06、08、10、12,14、16 mL,分别置25 mL的量瓶中,加01 mol/L HCl定容至刻度,在265 nm处测吸光度,以吸光度为横坐标,浓度为纵坐标,作图,得直线方程为：Y=0014 9X-0000 1，r=0999 9。结果表明盐酸小檗碱浓度在0001 8～0014 mg/mL之间,浓度与吸光度成良好的线性关系。 　　212黄柏总生物碱的提取方法取黄柏粉末200 g,加体积分数60%的乙醇加热回流提取3次,每次8倍量的溶剂提取1 h,合并3次提取液,过滤。滤液减压真空浓缩至无醇味。将提取液转移至1 000 mL的容量瓶,加蒸馏水定容至刻度,备用。 　　213黄柏提取液中总生物碱的含量测定取黄柏提取液02 mL,用01 mol/L HCl稀释至25 mL,在265 nm处测吸光度为0374,计算总生物碱的浓度为0684 mg/mL。 　　22动态吸附工艺研究 　　上样量和流速的确定：取预处理好的AB8树脂,湿法装柱(柱内径约11 mm,柱体积约10 mL)。加入黄柏提取液(上样浓度为0684 mg/L),控制流速20 mL/h,每30 mL(1个流份)收集1瓶,经适当稀释后测吸光度,计算其中总生物碱的浓度,结果见表1a和图2a。 　　同法操作,取黄柏提取液,控制流速分别为40、50 mL /h,每25 mL(1个流份)收集1瓶,经适当稀释后测每个流份中的总生物碱的浓度,结果见表1b,表1c,并绘制出泄漏曲线见图2b,图2c。表中吸附量和累积吸附量的计算公式如下：mi，吸附量=V(0684-ρi)，其中i为瓶号，V为流速(mL/h)，ρi为第i瓶的浓度(mg/mL);mn，累积吸附量=ni=1mi，吸附量。 　　从表1和图2可以看出,流速越小,树脂的饱和吸附量越大,20、40、50 mL /h的饱和吸附量分别为338610、321350、312530 mg。因为流速越小,树脂与样品的接触时间越长,传质越充分,吸附越完全。但流速过小,处理量低,产量下降