应用两相分离技术研究红壤微生物组成的探讨-土壤学报.PDF

第44 卷 第1 期 土 壤 学 报 Vol1 44,No1 1 2007 年 1 月 ACTA PEDOLOGICA SINICA Jan. , 2007 * 1 2 1­ 1 李 妍 倪德军 胡红青 向万胜 李学垣 ( 1 华中农业大学亚热带农业资源与环境农业部重点实验室, 武汉 4 0070) (2 华中农业大学生命科技学院, 武汉 4 0070) ( 中国科学院亚热带农业生态研究所, 长沙 410125) 采集了鄂南不同母质和利用现状的6 个红壤样, 用 2% PEG+ 6% Dextran 两相分离技术( Aque2 ous two2phase partitioning technique, 简写为A2PP) 纯化细菌, 测定细菌生物量, 研究两相分离技术在土壤微生物 研究领域的可应用性。结果表明:( 1) 采用01 1% 胆酸钠、钠型离子交换树脂、玻璃珠与土壤一起在4e 下振荡 2h, 能较好地分散土壤细菌。供试土样细菌分离率介于01 41~ 0160 之间, 不同母质发育的红壤相比, 细菌分离 率高低依次为:砂页岩 花岗岩 第四纪红色粘土;(2)A2PP 技术能较好地纯化土壤中的细菌。6 个供试原样 的细菌多与土壤颗粒及有机质结合在一起, 而两相分离技术能够得到较为纯净的细菌个体, 土样细菌大多被 分离存在于PEG 相中, 纯化率为6 % ~ 78% ; 细菌提取率介于01 1~ 0148, 不同母质发育土壤细菌提取率顺序 与细菌分离率顺序相同;( ) 供试土样的细菌形态都以小球状、小杆状细菌为主。 红壤; 两相分离技术;细菌纯化 S15 A [1] 土壤微生物是土壤中最活跃的因子之一 , 其 为一种温和的生物分离方法, 相对于原始的纯化手 生物类群主要有细菌、真菌、藻类等, 在土壤生态系 段具有过程简单、纯化时间较短等特点, 应用领域广 [ 2] [ 8,9] 统中具有非常重要的作用, 是土壤养分的库和源 , 泛 。目前应用最普遍的是PEG(聚乙二醇)/ Dex2 [ ] 也是土壤有机质和相关养分转化和循环的动力 , tran(葡聚糖) 系统和PEG/ 无机盐( 磷酸盐或硫酸盐) 已成为土壤培肥、耕作制度改革和作物栽培实践中 系统。对于不同的两相组分, 分离时间不尽相 [4] [ 5, 10] 的重要理论依据之一 。土壤微生物通常紧密地粘 同 。 附于土壤粘土矿物和有机质颗粒上, 很难分离, 从土 红壤是亚热带地区的主要土壤类型, 也是我国 壤中提取与纯化具有代表性的微生物, 对研究土壤 粮食及经济作物和林业、畜牧业发展的重要资源。 微生物的群落结构组成、土壤养分的迁移转化以及 本实验采集了湖北几种有代表