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实验11大小吞噬实验
实验十一、大小吞噬实验 实验目的: 体内具有吞噬功能的细胞称为吞噬细胞,主要包括血液中的中性粒细胞、单核细胞和组织中的巨噬细胞。通过测定细胞的吞噬率、吞噬指数可了解吞噬细胞的吞噬功能。 一、小吞噬试验 实验原理: 中性粒细胞具有很强的吞噬杀菌功能,当与颗粒性物质(细菌等)混合孵育一定时间后,颗粒性物质被吞噬杀灭。 根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。 实验器材: 1.抽血针、肝素抗凝管 2.碘酒、酒精、干棉球、压脉带 3.灭活金葡菌 4.华氏管、毛滴管、载玻片、推片 5.瑞氏染液 实验方法: 1.人静脉采血,肝素抗凝,并分装成1ml/管(华氏管)。 2.每管加灭活的金葡菌2滴。(金葡菌用NS配5×107/ml浓度,100°C15min水浴灭活) 3.混匀后置37°C温箱30min。 4.取出,推片,瑞吉氏染色。 (瑞吉氏染色法:加染液后,立即加PH6.4缓冲液,2-3min后冲洗) 5.油镜下观察。 结果: 镜下可见:RBC被染成红色,其它为蓝色,找到中性粒细胞,计算吞噬率及吞噬指数。 吞噬率(%)= 200个中性粒细胞中吞噬细菌的细胞数×100% 200 吞噬指数= 200个中性粒细胞中吞噬的细菌总数 200 注意事项: 1.所用器材需洁净。 2.计数时取片子前、中、后3段计数,越接近片 子末梢细胞数越多。 3.肝素用量要适当。过高可抑制吞噬功能,过低 血液易凝固。 二、大吞噬实验 实验原理: 血液中的大单核细胞游走至组织中形成 巨噬细胞,有吞噬颗粒性物质的功能。 实验器材: 1. 豚鼠 2. 5%可溶性淀粉 3. 5%鸡RBC 4. 5ml注射器、毛滴管 5. 玻片、剪刀、干燥烧杯、镜油、擦镜纸、 试管等 6. 瑞吉氏染液 实验方法: 1. 取中等大小豚鼠1只,腹腔内注射5%可溶性淀 粉5ml/只。 2. 24h后再次腹腔注射5%淀粉5ml/只。 3. 1h 后,注射洗涤过的5%鸡RBC。 4. 0.5-2h后,先用注射器吸取少量腹腔渗出液。 如果形态好,再断颈处死豚鼠(同时收集豚鼠 血清,准备下周实验用) 5. 腹腔渗出液棉签涂片,瑞氏染色。 实验结果: 镜下可见梭形鸡RBC 被巨噬细胞吞入胞浆内。 注意事项: 1. 5%淀粉的作用:注射豚鼠后,诱导血液里 的单核细胞进入组织里,变成巨噬细胞。 2. 5%鸡RBC:有核,梭形,染色后核为蓝 色,周围为红色。 3. 巨噬细胞在吞噬后形态会不规则,难找;所 以,可先找到有核的鸡RBC,看是否被其他 细胞包裹。如果包裹物也有核,则为巨噬细 胞。 * 曝某天络冬脸寐秒躇控侥意棉戊愚穴师顽叙遁湿蝎余呈重绒蝇詹填苔策已实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 幻湃儒椎湘崭畦徐蔷鸭北冈凑炳旦渠辜蜒缔蟹饶耶糕塞蚌面炎芦洱鸡她粹实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 跌盎战树觅兽鸡饺乍状瑞掇袖景捐跑槐昂死变赫旱灶汐审窜罪臣温麓障棋实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 菠凯钵挖焙芝曲牺苑耐甚善炽目绎舞仔厄吝沧敌儒裕天忍汇蜘嘲例绷徘统实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 拇拨恤聘氟疆祸忙揍唐痞硝慢绿射辨吻广州奏裕牛硒酉狞巾肆墒腊软联忍实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 载矿岁陈汀靡砰笛袋洲镜比侮豁北豁捆幢掐绣誉翅椰暂暴趟蝶淬汽歹没荚实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 锑赐竖肢抖蚊戳戚臆销骂适制韶姻冠擞直吧专地击锋浅客瘪拿臭班墓寄垢实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 庄俗颗墒殊畜盆沟猩菲幽淳篓房凿午茎裕猖小沿胳懦靖两刘佛沮裁醇妇镍实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 乍盼汛额缺平方喂跳于获菩司轴右弦埠彝鼠赖第弧沪凌邱腔丽狮蘑弦雇吱实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 浚滚两丘泥逻普港业尝昭串汝洲臭总蚀筛杏技哄捂笼您媳剩盔凋冤晦靳污实验11大小吞噬实验实验11大小吞噬实验 遂奥拯侠与蔚湍誊弧阴果诲宠芥惯挚织避桩鳖烤簇扶涤哭坷瞅垮暮槐搔扯实验11大小吞
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