液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中沃尼妙林残留.pdfVIP

第38卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第7期 Chinese of 103l—1035 2010年7月 Journal Chemistry Analytical DOI：lO．3724／SP．J．1096．2,010．01的1 液相色谱一串联质谱法测定鸡组织中沃尼妙林残留 王蕊 远立国 贺利民 朱理想 罗显阳 刘雅红’ (华南农业大学兽医学院，广州510642) 摘要建立了鸡组织中沃尼妙林残留的液相色谱一电喷雾串联质谱(LC—ESI．MS／MS)检测方法。样品用乙 腈提取后，过Strata-X—C固相萃取小柱净化。以乙腈m．1％甲酸水溶液(35：65，WV)为流动相，经LunaCl。色 谱柱分离，采用电喷雾电离，多反应监测(MRM)正离子模式对沃尼妙林进行定性与定量分析。采用基质匹配 法，对鸡皮肤、肌肉、肾脏和肝脏中沃尼妙林的含量进行标准校正，在5(7．5)一500tLIg／ks范围内线性良好 (，0．998)，在鸡肝脏中的检出限(LOD)及定量限(LOQ)分别为4．0和7．5vLg／kg；其它3种组织中的LOD 及LOQ分别为2．5和5．0 vLg／kg。在5(7．5)，50及500峭／ks添加水平下，4中组织中沃尼妙林的平均回收 率为78．5％～104．O％。日内相对标准偏差(RSD)为1．2％一9．8％，日间相对标准偏差为3．7％一13．2％。 关键词 沃尼妙林；鸡组织；残留；液相色谱．串联质谱 1 引 言 于其具有抗菌谱广、抗菌活性强、安全性高、耐药性低等特点正Et益受到广泛关注。目前，欧洲、澳大利 亚、美国、南美洲及亚洲的部分国家已批准使用沃尼妙林，主要用于防治畜禽支原体及肠道螺旋体感 染…。沃尼妙林在动物性食品中的残留可能危害人体健康，有必要建立动物性食品中沃尼妙林残留的 检测方法。 肾100¨g／kg、肝500wg／kg。沃尼妙林为二萜类化合物，紫外吸收弱，其原药及制剂分析采用高效液相 色谱(HPLC)远紫外检测HJ，而动物组织在远紫外区杂质干扰多，紫外检测难以满足残留分析要求。目 尼妙林等5种药物残留，方法灵敏度较高，但不适用于动物组织中沃尼妙林残留检测。本实验采用乙腈 提取，固相萃取净化，建立了灵敏、可靠的鸡组织中沃尼妙林残留的高效液相色谱一串联质谱检测方法。 2实验部分 2．1仪器与试剂 1200型液相色谱系统(美国安捷伦公司)；API4000电喷雾一串联四级杆质谱仪(美国应用 Agilent 生物系统公司)；Luna mm×2．0 C18色谱柱(150 固相萃取(SPE)小柱(60mg，3 固相萃取仪(美国Waters公司)。 醇、甲酸、乙腈和乙酸铵(色谱纯，美国FisherScientic公司)；其它试剂均为分析纯，水为超纯水。 2．2样品前处理 准确称取2 mL聚丙烯离心管中，加入5mL乙腈，匀浆30s，振荡30min， g鸡组织匀浆试样于15 再超声10min，以7000r／min离心10min，转移上层清液。残余物用5mL乙腈重复提取一次，离心，合 2009．10．14收稿；2010-01-28接受 本文系“十一五”国家科技支撑计划课题(No．2006BAD311301)资助 }E—mail：gale@8c蚰．edu．cn 1032 分析化学 第38卷 并两次提取液。 用甲醇活化Strata．X．C固相萃取小柱，2％甲酸水溶液平衡。将乙腈提取液过柱，依次用2％甲酸水 溶液、甲醇、正己烷各3mL淋洗小柱，抽干，最后用2mL5％氨甲醇洗脱，收集洗脱液，在50℃下氮气吹 干。残渣用1mL乙腈一水溶液(50：50，WV)超声溶解，旋涡混匀后，过0．22斗m的针头滤膜，供检测。 2．3基质匹配标准工作液 2．3．1 沃尼妙林标准储备溶液 准确称取适量酒石酸沃尼妙林对照品(