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沙门氏菌快速检测技术概要1
沙门氏菌摘 要:沙门氏菌是食品中最常见的致病菌,是导致食物中毒的重要病原菌之一,严重危害人类的健康安全和食品安全。传统的细菌学检测耗时繁琐,不能满足当今发展的需求。本文简要介绍了近年来沙门氏菌快速检测技术研究进展,并分析各种检测方法的优缺点,以期寻找一种快速、简便、特异、灵敏,能检测绝大多数血清型沙门氏菌的方法。关键词:沙门氏菌;快速检测、免疫学技术、分子生物学技术Research Progress on the Rapid Detection of Salmonella
Zhao Hui
(College of Food Science and Engineering , Northwest AF University , Yangling, Shaanxi 712100, China)?
Abstract:Salmonella is the most common pathogenic bacteria in food, which can cause bromatoxism and bring about hazard on human , The traditional bacteriology detections have not bee satisfied the requirement of development because of time -consuming. This review briefly introduced research progress of the rapid detection of Salmonella in recent years and analyzed the advantages and disadvantages of various detection methods,hoping to find a fast,simple,specific and sensitive method that could detect the majority serotypes of Salmonella.
Keywords: almonella;rapid detection;immunological techniques;molecular biological techniques
随着国民经济的发展,食品、海产品中存在的卫生隐患问题愈发严重,在世界各地的食物中毒中,沙门氏菌引起的中毒病例占首位或第 2 位,在中国,每年由沙门氏菌引起的食物中毒事件占到全部食物中毒事件的40% -60%[1]。沙门氏菌是常见的重要食源性致病菌,它们广泛分布在河口、海水及沉积物、水产养殖等区域,寄生在海洋生物体中,通过污染的动物源性食品感染人类,导致食物中毒,严重危害人体健康。目前我国食品中致病菌的检验普遍采用传统的细菌学检验方法和血清学方法,这些方法一般都复杂繁琐、耗时费力,大致需要 4 d~6 d 才能出检验结果,难以应对突发事件的发生。因此,建立一些快速、简便、准确度高的检测方法一直是沙门氏菌检测研究的核心问题。随着生物技术的进步,在食源性致病菌检测领域出现了许多比传统方法更快捷、敏感性更好的新技术,如免疫学检测技术和分子生物学检测技术等。本文总结了一些食品中沙门氏菌的快速检测方法,从以传统方法为基础发展到以免疫学为基础的或以分子生物学为基础的快速检测方法,以期加快检测工作的进行[2]。
1 免疫学检测技术
在所有食品中的沙门氏菌的检测技术手段中,免疫学检测技术占有重要的地位,主要是因为其价格低廉,不需要特定的实验仪器,容易在基层推广开来。免疫学技术以抗原和抗体的特异性结合反应为基础,通过病原体刺激机体产生免疫球蛋白(抗体),再辅以免疫放大技术来进行检测。抗原和抗体的结合反应可在很短时间内完成,同时由于敏感的标记技术及示踪技术的应用,使得沙门氏菌可在较短的时间内超微量而特异地检出。目前已建立的沙门氏菌免疫学检测方法主要有以下几种:
1.1免疫荧光技术(IFT)免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理, 先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体, 再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体) 在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素, 利用荧光显微镜观察标本, 荧光素受外来激发光的照射而发生明亮的荧光(黄色或橘红色),可以看见荧光所在的组织细胞,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
免疫荧光技术主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。直接法还可以清楚地观察抗原并用于定位标记观察。赵文学[3]等直接将沙门氏菌固定在载玻片上,
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