一株高效苯酚降解菌的分离和鉴定及特性的研究.pdfVIP

摘要 酚类化合物为细胞原浆毒物，属高毒性物质。这类物质来源广泛。通常污染水 源，毒死鱼虾，危害农作物，并严重威胁人类的健康。含酚有机物的毒性还在于其 只能被少数的微生物分解。从自然界中筛选分离出能够降解特定污染物的高效菌种， 有针对性地投加到已有的污水处理系统中的生物强化技术，能够快速提供大量具有 特殊作用的微生物，在有毒有害污染物治理中显示出巨大的潜力． 本研究从污水处理厂的初级处理池中分离到一株高效苯酚降解菌JF-10，该菌能 在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基中生长，并在60小时内将1000mg／L苯酚完全 降解，当培养基中添加有0．05％酵母粉时，完全降解的时间将被缩短到24小时。JF_10 为革兰氏阴性菌，杆状，有运动性，葡萄糖发酵产酸，氧化酶阳性，过氧化氢酶阳 性，硝酸盐还原阳性，具有典型假单胞菌属的鉴定特征。JF—lO的16SrDNA序列与 P rDNA序列相似性分别 为99％、97％、96％。gyrB基因序列分析和生理生化特征进一步表明，该菌可能是假单 胞菌属的一个新种。 最高。按重金属对苯酚降解的影响，可将其分为两组：Cd”、C02+对苯酚降解无促进 作用；Mn2．、Cu”、Ni“，Pb”在一定的浓度范围对苯酚的降解有促进作用。JF_10对 苯甲酸钠，不能利用邻甲酚、a一萘酚、甲苯、苯胺，从它们对苯酚降解的影响来看： Q一萘酚大于苯胺，而甲苯对苯酚降解没有影响。苯酚可能通过共代谢促进邻甲酚的 降解． JF一10的苯酚降解基因定位于染色体上，用一对保守引物，以JF_10的总DNA 为模板，扩增得到600多个碱基的片段，该片段与Pseudomonasmendocina同源性 92％，Pseudomonas putida菌株P-8同源性90％。Pseudomonasputida菌株KL33 88％，以该片段为探针，为了得到含有整个苯酚降解基因簇，构建BAC文库．为菌种的 遗传改造和基因工程菌的构建奠定了基础． 关键词：苯酚，生物降解，假单胞菌，环境因素，苯酚降解基因，BAC文库 IV ＼一 Abstract Phenolis toxical andis harmfulto substance strongly very origin cytoplasm．Its inoⅢlife．ItCall water、kill farmto andeven existed fish、do wildly pollute crops heavily threatourhealth．The call be severalkindsof phenoliccompoundonlydegradedby thatCall hadbeenisolated microbe．Bacteria from effectivelydegradephenoliccompound natural callbe intowastewatertreat and environment,they systemobviously pour enhancedthe have