Baytril对BHK21细胞大肠杆菌、猪鼻支原体污染清除研究.pdfVIP

摘 要 细胞培养中的细菌和支原体污染，特别是支原体污染一直都是细胞培养的难题。 污染了细菌和支原体的细胞，虽然一般选择废弃，但有些重要的细胞依然需要靠清 除污染来挽救。鉴于细胞培养的污染清除中存在的诸多问题，本研究以BHK-21细 胞，又可以抑制大肠杆菌和猪鼻支原体的Ba”m浓度来做进一步的实验。 肠杆菌人工污染的BHK．21细胞里，通过洗涮、冲洗、重点冲洗、刮出、消化、贴 壁后再冲洗等循环往复的处理等办法。在抗菌药Baytrjl的保护下，大幅度地稀释大 肠杆菌在细胞群里面的浓度，同时也在用无抗菌药的培养液做大肠杆菌的监测。监 测显示，进行到第4个清污循环时，BHK．21细胞里大肠杆菌的污染已经被彻底清除。 在支原体的的实验里，人为感染猪鼻支原体的BHK一21细胞，同样是用含 用DNA荧光染色法和PCR法对猪鼻支原体的清除进行不断监测，结果发现，同样 光染色法要敏感得多。 最后通过生物统计学里的配对资料符号检验法检验后得出，本方法对清除 BHK021细胞系中的大肠杆菌、猪鼻支原体感染具有极显著的效果。 关键词：细胞培养；细菌；支原体：Baytril；清除污染 Summary and contaminationadifficult in Thebacteria is cell mycoplasmas problemculture， the contaminatedcellwillbethrow especiallymycoplasma’S．The awaycommonly,but cellmustberescuewith contamination．ForSO to important eliminating manyproblems contaminationincell studiesmaketheBHK-21 eliminatethe culture，the cell，Baytril and asresearch several 1／10 diluted antibiotic,E．coliM．hyorhinis object．With grades minimal concentrationwastested the96 measure，the inhibitory throulghwellcell Baytril’S forBHK·21 itis60—80PPM．Forthesamemethod，the culturecluster cell，and Baytril’S forE．colitoo，anditis MICis0．5·2PPMfor MICWastested 1PPM．Ba”ril’s M．hyorhini 【硎．SoIselectedthe10PPMconcentrationsforthelater itcan Baytril experiment，because theE．coliwithoutharmtocell． restrain being At ofbacteri