使用阵列式SPR 传感器ProteOn XPR36 系统进行受体功能研究.PDFVIP

使用阵列式SPR 传感器ProteOn XPR36 系统进行受体功能研究 在复杂的生命活动中，蛋白质能够传递特定的信号，组合成多蛋白复合物，控制酶的活性，并调节 细胞的活动。这些工作大多需要特定的蛋白与蛋白之间的相互作用来完成。现在越来越多的研究是围绕 着蛋白-蛋白相互作用的机制、反应亲和力的差异以及抑制剂对蛋白复合物形成的影响等方面展开的。深 入了解这些相互作用的机理或是强弱关系，对于认识生命的过程的，揭示疾病的发生发展过程，乃至对 药物开发提供靶点和候选物，都有非常重要的意义1。 表面等离子体共振（Surface Plasmon 关系，或者用突变制造一些人工配体，通过研究突 Resonance，SPR ）技术是一种快速进行体外生物 变型和野生型配体与受体之间结合特性的差异，来 分子间相互作用分析的工具，而且具有非标记、实 揭示受体生物学功能的产生机制，从而为疾病的机 时性和精确定量的优点。目前，利用这一技术进行 理研究或药物发现提供理论基础。利用 Bio-Rad 生物分子相互作用分析的仪器种类很多，美国 公司ProteOn XPR36 系统进行这方面研究，可以 Bio-Rad 公司必威体育精装版推出的一款ProteOn XPR36 蛋 极大地简化实验步骤。只需要在芯片的不同通道上 白相互作用阵列系统，就是其中的优秀代表。如下 偶联不同亚型的受体，然后不同浓度的配体同时流 图所示，这款仪器的芯片上有36 个相互作用位点， 过芯片，只需一次就可以测出配体和多个受体的亲 排成6×6 的阵列形式，可以同时标记1-6 种不同的 和力。也可以不同配体同时流过不同通道，根据反 配体分子，平行地检测6 个不同分析物或分析物的 应曲线即可判断不同配-受体间相互作用的快慢和 6 个浓度，因而可以平行分析多对相互作用2 。这 大致强弱关系，如下图所示。 种分析方式对于当今生命科学研究非常有价值，正 如美国加州大学Irvine 分校的Robert Corn 所说： “要进行严格意义上的蛋白质组学研究，你需要同 时研究多对蛋白之间的相互作用”3，因为多蛋白平 行分析，不仅带来了效率的提高，更给出了在严格 相同条件下检测的结果可靠性和重复性。 利用这种分析方法，研究者可以非常方便地进 关于这方面的研究，以色列 Weizmann 研究 行配体和受体研究。现在受体功能的研究已经从传 所的研究小组给出了一个出色的例子4,5 。以往的 统的观察受体和配体的结合与否，深入到受体生物 研究发现，IFNα 主要表现出明显的抗病毒作用， 学功能的产生机理上。因此，常常需要观察天然存 但抗肿瘤增殖的作用却比较弱，相反IFNβ的抗肿 在的配体和不同亚型的受体之间的相互作用强弱 瘤增殖比较强。两种干扰素都结合受体 IFNAR， 2009年12月25日第七十一期 第 32 页，共 40 页 下一页 返回 那么功能差异的原因是什么呢？这个小组的研究 人员更快速方便，更准确地测定生物分子间的相互 人员将 IFNα 受体的两个亚基固定在 ProteOn 作用数据。点击索取更多技术和应用资料！ XPR36 系统芯片的不同通道上，分别测定这两种 参考文献： 干扰素和受体两个亚基的亲和力，发现IFNβ与其 受体各亚基的亲和力明显强于 IFNα。是不是亲和 1. Chen Katz,et al.; Molecular basis of the 力强弱决定了I 类干扰素的抗肿瘤作用呢？研究人 interaction between the antiapoptotic Bcl-2 family 员用噬菌体展示技术筛选得到了IFNα的几个突变 proteins and the proapoptotic prote