AccQ.Tag内标法测定精氨酸发酵液中精氨酸含量.pdfVIP

Ef~1\]茜望主: AccO. Tag 内标法测定精氨酸发酵液中精氨酸含量 黎永贤(广东逸舒制药股份有限公司，广东肇庆 526061) 陈梓芬(肇庆市翔兴药业有限公司，广东肇庆 52606 1) 草亮(肇庆学院化学化工学院，广东肇庆 52606 1) 摘要:目的:建立AccQ.Tag 内标法测定精氨酸发酵液中 1 . 3 色谱条件 精氨酸含量的高效液相色谱法。 方法:这用 Hypersil ODS 色谱 检测波长:248nm，柱温:37.0C，进样体积:10μL， 流动相: 拉(4.6rnmX 150rnmx4μm) ，流动相:乙精-错画在钩缓冲液-水经 乙腊-醋酸铀缓冲撞-水经梯度洗脱，该条件下，19种标准氨基 梯度洗脱(醋酸铀缓冲液pH=4.95) ;流这:2.2mL/min，进样体 酸的分离情况见图l。 和、: 10μL，在主温 37.0C，检测波长:248nm，结采:线性方程y= 0.0144X+0.0135: ，相关系数为0.9994，最低检澳H民:0.43ng/μL， 回收率在98%-102%之间，RSD%为 0.7%。 结论:方法灵敏，结 19 果准确可靠，可用于精氨酸发酵涣含量测定。 关键词:AccQ.Tag 内标法;精氨酸发酵液;含量;测定 在自然界中氨基酸是一种重要的生命物质。它对动植物 体内蛋白质的合成起着重要的作用，已成为生命科学中重点的 ，。 扭 研究对象之一。近年来，衍生色谱撞开始应用于氨基酸的测 图 1 19种标准氨基酸图i普 定，由于多数氨基酸没有显色基团，且极性很大，无捷反相分 1 天冬氯醺，2丝氨醺，3谷氯醺，4甘氯..5.组氨醺，6.精氯醺，7.苏氨 酸，8.芮氨磁，9麟氨酸，10脱氨磁，1 1 .酶氯隘，12 靠自氯醺， 13.蛋氨酸. 离，所以需对氨基酸进行衍生，以增加显色基团，提高检测灵敏 14.盐隘鸟氯画量，15.盐醺赖氨隘，16异亮氨酸.17亮氯醺.18.苯丙氯磁. 度，改变样品极性，改变分离模式。 19色氯醺 AccQ.Tag 方法的基础是专为氨基酸分析而开发的衍生试 1.4 内标溶液 剂-AQC(6-氨基喳琳基-N-经基珑甜酸亚氨基氨基甲酸醋) , 准确称取内析、物4-氨基丁酸l∞吨，用水溶解并定容至 AQC是一种新型的氨基衍生试剂。内析、物为4-氨基丁酸。 本 50mL量瓶中，摇匀，备用。 文旨在建立一套可靠，快速，分离效果好，灵敏度高，定量准确 1 . 5 对照晶溶液 的精氨酸发酵液中精氨酸的含量测定方怯，以期对精氨酸发酵