4-羟基苯乙烯基吡啶为辣根过氧化物酶底物的酶荧光免疫传感体系测定布氏杆菌抗体.pdfVIP

2∞8 年1白ì 66 卷 VoJ. 66， 2∞S 化 学 学报 第 1 期. 73-78 ACTA CHlMlCA S刷lCA No . 1, 73- 78 · 研究论文 · 今泾基苯乙烯基毗院为辣根过氧化物酶底物的酶荧光免疫传感体系 测定布氏杆菌抗体 龚福春* 湛雪辉 龙妹 曹忠 谭淑珍 谭亚非 (长沙理工大学化学与环境工程学院 长沙 410076) 摘要 合成了一种新型辣根过氧化物酶(HR?)荧光底物-4-泾基苯乙基毗咙(pHSP)，并首次将它运用于酶联荧光免疫传 的荧光响应性能优于传统 感体系 对pHSP 化学性质的研究证实， pHSP在空气中较稳定， 对HRP， H 0 HRP 荧光底物， 2 2 如对汲苯乙酸、Amplex Red 和使味醇等.在pH5.8 的 Britton-Robinson 缓冲溶液中， pHSP本身只有极弱的荧光， 在HRP­ I gG 催化下可被H 0 氧化成二聚你产物，该二期本在 300 nm 的激发光下能发射波长为437 nm 的强荧光， 并且反应体 2 Z 系创荧光增加与 HRP 童在一定浓度范国内成线性相关 根据此原理，建立了兔布氏杆菌抗体的弱联荧光传感分析新方 8 1 11 法.运用制备的传感装置测定兔布氏杆商抗体的线性范困为 6.3X 1O-1l ~1 X 10- mol.L- ， 抗体检出限为 6.3X 10- I mo].L- ， 相对标准偏差为 4. 1% (n= 11). pHSP 的二!l体产物水溶性很低， 利用设计的装置较好地解决了传统测定溶液 体 系方法灵敏度不高的问题. 关键词 4-段基苯乙烯基毗咙;辣根过氧化物酶荧光底物;酶联免疫传感;布氏杆商抗体 A Fluorometric Enzyme-linked Immunosensing System Using 4幽 (p-Hydroxystyryl)pyridine As a New Substrate of Horseradish Peroxidase for Brucella melitensis Antibody Assay GONG, Fu-Chun* ZHAN, Xue-Hui LONG, Shu CAO, Zhong