免疫细胞化学在胸腹水中的技术与应用进展.pdfVIP

维普资讯 ejIal碴PracticalMedldneApril，2OO6，Co1．11，No．2 l32 · 综 述 · 免疫细胞化学在胸腹水中的技术与应用进展 龚 伟 孙洪鸣 朱忆凌 (丽水市中心医院，浙江 丽水 323000) 当前，免疫组化在外科病理学上已经被广泛应 方法：离心涂片 (cytospin8)空气干燥后再用乙醇固 用，但应用于细胞学上还不多，而在细胞病理学中 定即唧 ，液基细胞学薄片制片技术 (~mpmp)和福 面临的主要问题是弄清细胞的来源和性质。传统 尔马林固定石蜡包埋细胞团(formalin—fLxed，Dara伍n— 的形态学方法和标准能满足多数分化细胞的分类 embeddedcellblocks)技术 。认为离心涂片(cytospins) 和诊断，但对难以辨认的肿瘤细胞，结合免疫细胞 和液基细胞学薄片制片技术(thinprep)情况类似，29 化学 (Immunocytochemistry，1CC)，可达到诊断准确， 例(14例反应性胸水和 15例恶性胸水)中的66％的 减少失误的目的。且与切片相比，操作方便，勿需 病例出现高背景染色，尤其在三维的细胞团簇更明 石蜡高温处理，细胞抗原性保存较好，可以推广使 显，而细胞 团块技术 (cellblocks)背景染色只有 用。下面就免疫细胞化学的技术和诊断方面综述 17％，其结果更接近外科病理学的文献报道 ，且经 如下。 济实惠[5J。也有观点认为液基细胞学薄片制片技 1 制片方法 (1)制备合格的涂片是形态学诊断 术(thinprep)几乎消除了背景的干扰 ，如红细胞或粘 和应用免疫细胞化学的重要基础和保证。有作者 液蛋白残留等，在这种玻片中进行免疫细胞化学染 认为背景中红细胞的多少与涂片质量有明显的关 色，可以产生非常好的效果，包括染色模式和强度。 系，红细胞越多，往往有核细胞成分则少见，癌细胞 此外，还能节省抗体的使用。与在细胞团块技术 也稀少、单个存在，或不典型…。对于标本应新鲜 (cellblocks)基础上进行免疫细胞化学相比，除了细 送检，不能送检者应放在 5—6℃冰箱保存，否则各 胞核标记物(Ki67，PCNA和 P53)略差外，两者相差 种细胞会变性。国内有观点认为当离心后发现沉 无几 J。(5)由于细胞标本不能长期保存 ，虽然制 淀红细胞较多时，应当吸去上清液后，取 自细胞层 成涂片后能长期保存 ，但其抗原活性保存不完全。 涂片。如离心后出现沉积物过多，可加入95％乙醇 有作者提出离心后弃上清液，加入 20％小牛血清 固定成凝块后再包埋切片，在此基础上再进行免疫 Iml，20％二甲亚砜 lml，再用脱脂棉包裹试管置于 细胞化学 J。(2)常规涂片2张，使细胞均匀地涂于 一 20一一7OqC冰箱中，可保存 1 1．5年 J。 玻片上，不宜过厚或过薄，晾干后固定于95％的乙 2 免疫细胞化学在胸 (腹)水细胞学诊断中的应用 醇中，室温下空气中干燥 30分钟，促使细胞贴附于 ICC不仅有助于 良恶性的判断，而且对常规涂片 载玻片上 ，减少在免疫细胞化学操作中的细胞损 中难以鉴别的间皮细胞和转移性腺癌的识别有重 失，再用95％乙醇固定 1O分钟，立即做免疫细胞化 要的参考作用。应用某些器官特异性抗原还可以 学染色或置4℃冰箱备用 2】。国内有作者认为乙醇 提示胸 (腹)水 中恶性细胞的来源，帮助找到原发 固定的细胞学标本比醛类固定的组织学标本更有 灶，提高细胞学诊断的准确性。对难以