羊抗鼠IgG 南方医科大学(英文版).pdfVIP

微生物学通报 NOV 20, 2009, 36(11): 1705~1709 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 狂犬病病毒糖蛋白在酿酒酵母中的表达 1,2 1* 1 1 1 1 1* 赵 慧 郑文岭 高 洋 张进芳 彭翼飞 张 宝 马文丽 (1. 510515) (2. 510640) 摘 要: 利用酿酒酵母表达系统表达狂犬病病毒糖蛋白 G, 可获得大量无致病的抗原, 为研究新 型狂犬病疫苗提供条件。构建Tat-G 融合基因, 通过EcoR I 和Xba I 酶切位点克隆至pYes2 表达 载体中, 醋酸锂法转化酿酒酵母, URA3 筛选鉴定阳性克隆, 阳性重组子经半乳糖诱导20 h 后, 提 取蛋白, SDS和Western blot 分析鉴定融合蛋白。SDS结果显示糖蛋白基因在酿酒酵 母中可能表达为2 种形式的蛋白, yGI 和yGII, 分子大小分别为66 kD 和56 kD, Western blot 显示 在 56 kD 处有特异性条带。结合前人的研究成果, 初步判断狂犬病病毒糖蛋白基因的跨膜 TD 区 和膜内编码区对 RV-G 蛋白分子的正确折叠和免疫活性等有至关重要的影响, 从而为进一步提高 yGII 蛋白的表达奠定基础。 关键词: 狂犬病病毒糖蛋白, Tat 肽, 酿酒酵母 Expression of Rabies Virus Glycoprotein Gene in Saccharomyces cerevisiae ZHAO Hui1,2 ZHENG Wen-Ling1* GAO Yang1 ZHANG Jin-Fang1 PENG Yi-Fei1 ZHANG Bao1 MA Wen-Li1* (1. Institute of Gene Engineer, Southern Medical University, Guangzhou, Guangdong 510515, China) (2. College of Nature Resources and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou, Guangdong 510640, China) Abstract: To obtain non-pathogenic rabies virus glycoprotein (RV-G), we expressed RV-G in Saccaromyces Cerevisiae (S. cerevisiae). In our study, tat-G fusion gene was cloned into the expression vector pYes2.0, which allows expr