有关布鲁氏病.pptVIP

（2）用抑制剂LY294002阻断PI3K/Akt信号通路，实时定量PCR和流式细胞仪检测表明：阻断该信号通路可促进布鲁氏菌介导巨噬细胞的凋亡进程。 3、细胞通路信号分子对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 实时定量PCR检测凋亡相关基因Bax 流式细胞仪检测感染细胞凋亡率 （3）用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002和AMPK的抑制剂Rapamycin分别阻断这两条信号通路，在布鲁氏菌感染巨噬细胞8h后，抑制了布鲁氏菌介导巨噬细胞的自噬作用。 3、细胞通路信号分子对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 正常RAW264.7巨噬细胞 布鲁氏菌16M感染的巨噬细胞 抑制剂LY294002作用布鲁氏菌16M感染的巨噬细胞 抑制剂Rapamycin作用布鲁氏菌16M感染的巨噬细胞 （4）用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002和AMPK的抑制剂Rapamycin分别阻断这两条信号通路，降低了布鲁氏菌在小鼠脾脏中的繁殖。 3、细胞通路信号分子对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 4、 microRNA对布鲁氏菌感染的调控作用 （1）羊种布鲁氏菌16M感染小鼠巨噬细胞RAW264.7，在感染后 4 h, 12 h, 24 h 和 36 h，提取总RNA， 高通量测序小于30nt的RNA，最终获得344个microRNA。 4、 microRNA对布鲁氏菌感染的调控作用 （2） 其中25个microRNA调控细胞凋亡途径。 （3） 通过荧光酶互作实验证明microRNA-1981调控凋亡相关基因Bcl-2和Bid的转录表达。 4、 microRNA对布鲁氏菌感染的调控作用 5、 自噬现象对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 同细胞凋亡一样，自噬也是细胞对自身和外界的生理性调控作用。 5、 自噬现象对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 （1）电镜观察羊种布鲁氏菌感染巨噬细胞，自噬体呈洋葱样结构，内含有布鲁氏菌和细胞碎片。 （2）布鲁氏菌自噬潮现象与标志性蛋白LC3-II表达呈正相关。 16M infection increases the expression level of LC3-II. Following 16M infection (MOI=100) or rapamycin treatment (Rapa, 100 nM) for 3, 6, 9, 12,15 or 18 h, RAW264.7cells were lysed and subjected to western blotting with the antibodies indicated. Densitometry was performed for quantification. The ratio of LC3-II to β-actin is presented below the blots. 5、 自噬现象对布鲁氏菌胞内生存的影响研究 1、布鲁氏菌与宿主细胞互作研究 从研究层次上，蛋白质的相互作用包括蛋白-蛋白的相互作用和蛋白-作用域间的相互作用。 常用的方法有酵母双杂交、免疫共沉淀、噬菌体展示等技术。 6、布鲁氏菌与宿主细胞互作研究 酵母双杂交技术 噬菌体展示技术 1、布鲁氏菌与宿主细胞互作研究 （1）通过酵母双杂交、免疫共沉淀、噬菌体展示技术的联合应用，共筛选到一批布鲁氏菌-巨噬细胞相互作用的蛋白分子。 6、布鲁氏菌与宿主细胞互作研究 Bos taurus similar to galactose-specific lectin Bos taurus similar to chemokine (C-X-C motif) ligand 16 Bos taurus thyroid hormone receptor associated protein 6 Bos taurus N-myc (and STAT) interactor Bos taurus similar to visual pigment-like receptor peropsin Equus caballus similar to LOC124446 protein Bos taurus similar to chemokine (C-X-C motif) ligand 16 Bos taurus SGT1, suppressor of G2 allele of SKP1 Bos taurus similar to 40S ribosomal protein S20 Bos taurus ISG15 ubiquitin-like modifier (ISG15) ……….. 6、布鲁氏菌与宿主细胞互作研究 酵母双杂交筛选到与布鲁氏菌相互作用巨噬细胞的蛋白分子。 1、布