肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默cd24-cd44人喉鳞癌干细胞生物学特性的改变.docVIP

肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默CD24-CD44+人喉鳞癌 干细胞生物学特性的改变 苏 静，薛海涛，田君海，张继华(河北医科大学第一医院耳鼻喉科，河北省石家庄市 050000) 引用本文：苏静，薛海涛，田君海，张继华. 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞生物学特性的改变[J].中国组织工程研究，2017，21():663-668. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.05.002 ORCID: 0000-0002-6659-4388(薛海涛) 文章快速阅读： 文题释义： 干细胞自我更新：自我更新是干细胞典型的特性，其主要反映干细胞在动态环境中维持自我稳定的能力。其在分化过程中，可通过不对称分化，一个细胞分化为次级细胞；另一个细胞分裂为与母代细胞相同的细胞。 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1：是热休克蛋白90家族内一重要的成员。正常表达肿瘤坏死因子受体相关蛋白1可抵御氧化损伤所致的细胞凋亡以及维持线粒体结构与功能的稳定。 摘要 背景：肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的异常表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。因此靶向抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达成为治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。 目的：观察肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默对人喉鳞癌干细胞生长及凋亡的影响。 方法：采用流式细胞技术特异性分离出CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。设计及合成肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的siRNA序列，脂质体TM2000转染CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。流式细胞仪、MTT实验、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验评价沉默肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因对CD24-CD44+喉鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响。 结果与结论：①相关因子表达：相比于CD24+CD44-的人喉鳞癌细胞，CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞内干性基因OCT4，SOX2，NANOG，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达均上调(P 0.05)。RNA干扰后，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达显著降低(P 0.05)；②细胞周期及增殖：肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的生长速度明显减慢(P 0.05)，细胞停滞在G0/G1期，在S期细胞数减少(P 0.05)，M期细胞无明显变化。肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的增殖受到明显的抑制(P 0.05)；③细胞克隆形成能力：相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞克隆形成能力显著下调(P 0.05)；④细胞凋亡：相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的凋亡基因BAD及BAX表达上调(P 0.05)；⑤结果表明，特异性干扰肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因表达可抑制人喉鳞癌干细胞增殖并促进其凋亡。 关键词： 干细胞；肿瘤干细胞；肿瘤坏死因子受体相关蛋白1；人喉鳞癌；化疗耐药；基因沉默；细胞数量；克隆形成；细胞增殖；细胞凋亡；组织工程 主题词： 喉肿瘤；肿瘤干细胞；细胞增殖；细胞凋亡；RNA，小分子干扰 基金资助： 河北省重点研发计划自筹项目(152777179) TRAP1 gene silencing effect on biological properties of CD24-CD44+ human laryngeal squamous cell carcinoma stem cells Su Jing, Xue Hai-tao, Tian Jun-hai, Zhang Ji-hua (Department of ENT, the First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, Hebei Province, China) Abstract BACKGROUND: Studies have indicated that the abnormal expression of tumor necrosis factor receptor-associated protein 1 (TRAP1) is closely related to the occurrence and development of a variety of tumors. Therefore, targeted inhibition of TRAP1 expression has become an important target for the treatment or intervention of tumor growth. OBJECTIVE: To explore t