气相色谱-高分辨质谱联用法检测人尿中21种兴奋剂-药学学报.DOCVIP

气相色谱-高分辨质谱联用法检测人尿中21种兴奋剂 邢延一*, 刘 欣, 张玉梅, 王小兵, 徐友宣 (国家体育总局反兴奋剂中心, 北京 ) 摘要: 采用气相色谱高分辨质谱联用技术建立人尿中包括诺龙、宝丹酮、美雄酮在内的种兴奋剂的检测方法。样品经液液萃取, 浓缩, 三甲基硅烷化衍生, 利用气相色谱/高分辨质谱及多离子检测技术 (MID) 同时检测种兴奋剂。按照世界反兴奋剂组织 (WADA) 认可实验室方法验证程序进行验证, 该方法的检出限为ng·mL?1水平; 回收率为66%～103% 之间 (n = 6), 回收率的相对标准偏差小于10.0%; 对3个不同浓度下样品定量检测的精密度测试结果表明, 精密度RSD分别低于9.5%, 10.0%, 9.7%。 关键词: 兴奋剂检测; 气相色谱; 高分辨质谱 中图分类号: R917A 文章编号: 0513-4870 (2012) 12-1667-04 Determination of doping in human urine by gas chromatography-high resolution mass spectrometry XING Yan-yi*, LIU Xin, ZHANG Yu-mei, WANG Xiao-bing, XU You-xuan (China Anti-Doping Agency, Beijing 100029, China) Abstract: A method was evaluated for determination of twenty-one doping (including nandrolone, boldenone and methandienone) in human urine by gas chromatography-high resolution mass spectrometry. Samples were prepared by liquid-liquid extraction, concentrated, TMS derivatization and limit of detection at ng·mL?1 by MID/GC/HRMS. According to the code of the World Anti-Doping Agency (WADA), precision and recoveries of the procedure were evaluated by replicate analysis (n = 6), the recoveries in the range of 66%?103%, with the RSD below 10.0%. The precision within the day of the method with three different concentrations was also determined, RSD were less than 9.5%, 10.0% and 9.7%. Key words: doping analysis; GC; HRMS (兴奋剂, 作为竞技体育的毒瘤, 不但影响体育竞赛的公平性, 也严重危害运动员的身体健康[1?3]。早在1968年, 国际奥委会和各单项协会就严令禁止使用兴奋剂[4]。随着科学水平的发展和检测技术的 进步, 禁用的兴奋剂种类已从最初的8种增至9大 类两百余种药物[5]。经典的兴奋剂检测方法主要包括气相色谱质谱联用 (GCMS) 和液相色谱质谱联用 (LCMS)。由于检测要求的不断提高, 各种兴奋剂的检出限也在不断降低, 气相色谱高分辨质谱、液相色谱?串联质谱等技术开始应用于兴奋剂等禁用物质的检测[67]。最初气相色谱高分辨质谱主要应用于检测5种低浓度的甾体类兴奋剂[8]。由于气相色谱高分辨质谱具 有去干扰能力强, 分析结果准确、灵敏度高的优点, 如果将其应用于更大范围检测, 势必对反兴奋剂事业起到更为有力的推动作用。因此本研究拟以世界反兴奋剂组织 (WADA) 对兴奋剂检测的技术标准为依据, 建立一套适合于常规检测, 能同时筛查多种兴奋剂的检测方法。试剂与仪器Finnigan DFS型高分辨质谱、Trace GC 2000气相色谱 (美国赛默飞公司); 低温恒温循环液浴两用槽 (杭州雪中炭公司); Legend T低速离心机 (美国赛默飞公司); Dr