第六章微生物生长与繁殖.pptVIP

《微生物学》 沈萍 第六章微生物的生长繁殖及其控制 细菌的个体生长 细菌的群体生长繁殖 环境对微生物生长影响及生长的测定 微生物的生长繁殖的控制 第二节 测定生长繁殖的方法 生长、繁殖的概念 一、测生长量 1、直接法：测湿重、体积（沉降量）或干重2、间接法 (1)比浊法:测菌悬液稀释液的透光值（OD值）。 (2)间接成分测定：测含氮量； 测C或P量； 测遗传物质量：DNA，RNA； (3)生理指标法： 呼吸强度、耗氧、酶活性、生物热等 二、计数法 1、直接计数： (1)计死活总菌数：显微镜下计数 (2)死活菌分别计数： 酵母：美蓝染色，活细胞无色，死细胞蓝色 细菌：丫啶橙染色，活细胞有橙色荧光， 死细胞发绿色荧光。 2、间接计数法： 是一种活菌计数法 (1)平板菌落计数：好氧菌、厌氧菌均可（实验） 菌样稀释→与培养基混匀浇注平板→倒置培养→统计菌落形 成单位cfu→乘以稀释倍数→菌样含菌数 用活菌指示剂TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)可使菌落在短时间内形成玫瑰红色——快速鉴定 (2)膜滤器法 Measuring antimicrobial activityMinimum inhibitory concentration (MIC) 第三节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长与同步生长 1、个体生长：一个微生物从小到大的生长过程。 2、同步生长：某一群体中所有个体细胞尽可能都处于分裂步调一致的生长状态。 二、单细胞微生物的典型生长曲线 定量描述液体培养基中M群体生长规律的实验曲线称为生长曲线， 恒化培养与恒浊培养的比较 Laboratory process developmentShake Flask Experiments Laboratory Process DevelopmentFermentor Experiments Agitation Cooling and heating Air inlet and outlet pH control Nutrient addition Inoculation Viewing port A series of fermentors used for lab scale process development Laboratory process developmentLab scale fermentor Experiments Batch process Fed-batch process Continuous process Semi-continuous process Fermentation process: Continuous process Industrial Scale up To transfer the pilot scale results into a commercially feasible production setting. Fermentor sizes range from 100 L to 500,000 L, depending on products. Industrial Fermentation Setting  恒化器： 一种微生物连续培养器。它以恒定的速度流出培养液，使容器中的微生物生长繁殖始终低于最快生长速度。这种容器反映的是培养基的化学环境恒定。而恒浊器反映的是细胞浊度（浓度）的恒定。 恒浊器 ：一种连续培养微生物的装置。可以根据培养液中的微生物的浓度，通过光电系统观控制培养液的流速，从而是微生物高密度的以恒定的速度生长。恒浊反映的是细胞密度的恒定。放线菌以及霉菌等形成菌丝的微生物不能通过恒浊器来连续培养。 装置 控制对象 生长限 制因子 培养液 流速 生长速度 产物 应用范围 恒化器 培养液 流速 有 恒定 低于最高生 长速度 不同生长速 度的菌体 实验室为主 恒浊器 菌液密度 无 不恒定 最高生长 速度 大量菌体或 与菌体生长 平行的代谢 产物 生产为主 Optimization of conditions for cell growth and product formation using shake flask experiments: 1. pH 2. Temperature 3. Dissolved oxygen (DO) 4.