肾移植术后患者PBMCs中NFκB的活性和TNFαmRNA的表达研究.pdfVIP

摘要 的表达研究 研究生 张燕松 导师 秦东春 郑州大学第一临床学院检验科 河南郑州450052 摘 要 核因子-r,B(nuclea 胞核提取物中发现的一种能与免疫球蛋白，c轻链基因的增强子心序列特异结 合的蛋白因子。静息状态下，NF．1出与抑制蛋白Ird3结合成三聚体而存在于细 胞质中。激活后，NF-rJ3转入细胞核，与相应的靶基因启动子或增强子上的基 序结合，调节这些基因的转录活性。 肾移植是目前治疗终末期肾最有效的方法，近年来取得很大的进展。随着 免疫抑制治疗的不断完善和手术技术的日趋成熟，术后存活率明显提高。然而， 由于按体重给药，术后发生排斥和感染的情况并不少见。这可能与个体的免疫 水平相关。 近年来研究发现，NF．心的激活不仅参与了肿瘤发生发展的许多环节，而 且已经成为肿瘤治疗的又一靶标。而在炎症与免疫方面，NF．1出作为一种重要 的转录因子，也起着重要的中介作用，已经证实它与许多炎症性疾病密切相关， 如类风湿性关节炎、哮喘、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病等。在器官移植方面， 特别是肾移植方面的研究，肾脏移植术后急性排斥反应时，NF．rd3被激活在动 物实验中已有相关报道。在肾移植术后发生感染病人方面的临床研究，还未曾 报道。 necrosis factor，TNF．a)是移植物排斥反应中调节因子， 肿瘤坏死因子-a(Tumour 可以介导多种炎症及免疫反应。在移植排斥反应中的重要作用己被公认，但是 摘要 其作用机制尚未完全明了。之前的研究主要是用放射免疫方法检测血浆中可溶 性TNF．a，而检测细胞内TNF．a的mRNA表达鲜有报道。 目的： 。 通过对肾移植术后病人外周血单个核细胞内NF．rB的活性检测及肿瘤坏死 个体免疫状态水平的相关性。旨在探讨NF．r,B和TNF-a是否能成为肾移植术后 病人免疫状态的检测指标。 方法： 1用密度梯度离心法分离肾移植术后病人及健康对照组外周血单个核细 胞。 2用化学发光凝胶电泳迁移率实验(EMSA)方法检测肾移植术后病人外周血 单个核细胞内NF．曲的活性。 3采用逆转录一聚合酶链反应(RT．PCR)方法检测肾移植术后病人外周血单 个核细胞内TNF．amRNA的表达情况。 4用SPSSl7．0统计软件处理，数值用均数±标准差(j±S)表示。实验结 验，检验水准a=0．05。 结果： l肾移植术后稳定组，感染组，排斥组患者外周血单个核细胞内NF．趣的 内NF．r,B的活性为2．70±O．58。稳定组和感染组，稳定组和排斥组，感染组和 排斥组结果差异有统计学意义(pO．05)。健康对照组和术后稳定组结果差异无统 计学意义pO．05)。 2肾移植术后稳定组，感染组，排斥组患者外周血单个核细胞内TNF．Q的 定组和排斥组，结果差异有统计学意义(p0．05)。感染组和排斥组，健康对照组 和术后稳定组结果差异无统计学意义pO．05)。 Ⅱ 摘要 结论： 1肾脏移植术后发生排斥时，外周血单个核细胞内NF．1cB的活性和TNF．a 的mRNA的表达水平显著升高。 2肾脏移植术后发生感染时，外周血单个核细胞内NF．1cB的活性和TNF．a 的mRNA的表达水平也升高。与排斥反应组相比，NF．v．B的活性差异有统计学 意义，而TNF．a的mRNA的差异无统计学意义。 3 NF．v,B的活性和TNF-amRNA的表达水平不排除非线性相关，两者有望 成为肾移植术后患者免疫状态的检测指标。 鲁 关键词：肾移植核