培养基母液的配制.pptVIP

任务二 培养基母液配制 主题二 培养基及其制备 任务二培养基母液配制 任务二培养基母液配制中浓度问题及相关计算 任务二 培养基母液配制 质量体积浓度：用单位体积（ 1升或1毫升）溶液中所含的溶质质量数来表示的浓度叫质 量-体积浓度，单位常用：g/L或 g/mL 或mg/mL如：0.9g/L的NaCl溶液——即每一升水中含有0.9克的氯化钠. 或微克／毫升表示或ppm、ppb表示。（ppm称为百万分率，l?ppm就是说百万之一或者是1微克／毫升，ppb称为十亿分率，l?ppb就是说十亿分之一或0.001微克／毫升）。 表2-1（P20）大量元素20倍浓缩液NH4NO3 浓度为33000 mg/L表示1L培养基中质量为33000mg，即33g. CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg，即10－5 g。 什么是培养基母液？ 母液：即贮备液，指培养基配制时欲配制液的浓缩液，一般母液配成比所需浓度放大10-100倍。 这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及配制时的快速移取，而且浓缩液体积小便于低温保藏。 母液配制时比所需浓度放大X倍，在配制培养基时按配制培养基的体积（V升）的V/X吸取母液即可。 培养基母液配制 培养基母液配制步骤 培养基母液配制计算 电子天平的使用方法 (1)开机??? ①开机前应检查天平的水平仪，确定天平处于水平状态。天平的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。??? ②天平接通电源预热至指定时间。 (2)校准??? 天平使用前要进行校准工作，校准程序可按说明书进行。用内装校准砝码或外置砝码校准。??? 当天平较长时间(5d以上)放置不用、天平位置发生移动、测试环境不理想或为获得精确称量等，均应在使用前进行天平的校准工作。 (3)称量??? 按下显示屏的开关键，待显示稳定的零点后，将被称量物体置于秤盘上，待数字稳定后，该数字即为被称量物的质量，按动相关的按键可以实现“去皮”，“增重”，“减重”等称量功能。 (4)称量结束后，应及时清理秤盘，关好天平门。???? 母液1中CaCl2.2H2O溶解时需加热溶解。 母液3FeSO4.7H2O和Na2EDTA需分别加热溶解后混合。 加热溶解的成分需冷却至室温后再转移至容量瓶定容。 容量瓶的定容方法 本课小结 培养基母液如何配制？ 作业： 1.培养基配制中所需要的仪器和用具有哪些？ 2.培养基配制的程序有哪些？ 3.分组配制培养基母液（母液1 1000ml；母液2 500ml；母液3 500ml；母液4 100ml。） 4.写成实训报告。 * * 知识回顾 N、P、K 微量元素 大量元素 Ca、Mg、S Fe、Mn、Zn 、B 、Cu 、Mo 活性物质 （植物激素） 支持物质 有机物质 无机盐 水 培养基 有机添加物 糖 维生素 肌醇 氨基酸 琼脂或 卡拉胶 介质和 溶媒 知识回顾 相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质 与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度精确 培养基各成分的浓度用什么表示可以既方便又精确地配制培养基呢？ 质量体积浓度 计算 称量 溶解 定容 写标签 保存 按下表进行计算 电子天平（百分之一、万分方一）烧杯、药匙 蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶 容量瓶（1000ml、500ml、 100ml） 母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间 冰箱 0.4 甘氨酸 0.1 盐酸硫胺素(维生素B1) 0.1 盐酸吡哆醇（维生素B6） 0.1 烟酸（维生素B3） 5 20 200 肌醇（环已六醇） 母液4 （有机 物质） 3.73 Na2.EDTA.2H2O 10 2.78 100 FeSO4. 7H2O 母液 3 （铁盐） 0.0025 CoCl2.6H2O 0.0025 CuSO4.5H2O 0.025 Na2.MoO4.2H2O 0.86 ZnSO4.7H2O 2.23 MnSO4.4H2O 0.62 H3BO4 10 0.083 100 KI 母液2 （微量 元素） 1.7 KH2PO4. 3.7 MgSO4.7H2O 4.4 CaCl.2H2O 19 KNO3 100 16.5 10 NH4NO3 母液1 （大量 元素） 配制1L培养基 吸取母液的毫升数（V/X） 数量（g/L） 浓缩倍数（X） 成分 母液 100 500 500 1000 配制母液 毫升数 0.4 甘氨酸 0.1 盐酸硫胺素(维生素B1) 0.1 盐酸吡哆醇（维生素B6） 0.1 烟酸（维生素B3） 20 200 肌醇（环已六醇） 母液4 （有机物质） 3.73 Na2.EDTA.2H2O 2.78 100 FeSO