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DNA提取方法进展
40 DNA提取方法进展 张宁,王凤山 (山东大学药学院生化与生物技术药物研究所。山东济南250012) 摘 项研究所必需的条件。近年来一些新的或改进的DNA提取纯化方法不断出现,本文对从陆生动物、植物、微 生物以及海洋生物提取DNA的方法进行综述。 关键词:DNA;提取;动物;植物;微生物;海洋生物 AdvancesofDNAextractionmethods ZHANG Ning,WANGFeng—shan Biochernicand Z Uni— (Institute of Biofef^砣oZogicnDrugs,Schoolof 250012,China) versity,Jinan extractionisabasic of andtheinte— Abstract:DNA molecular technology biology.Thepurity ofDNAstructureare fordifferent of re— grality necessary gene experiments cent therehavebeensomenewor DNAextractionmethods years improved methodsofDNAextractionfrom andmarine animals,plants,microorganisms in weresummarizedthisarticle. organisms 自20世纪50年代Watson和Crick提 多方法的改进都是在这些方法的基础上进行 出DNA双螺旋模型以来,分子生物学在广 的,这三种方法均利用蛋白酶K和十二烷基 度和深度上都获得空前的发展。DNA作为 分子生物学研究的基础,在生物领域尤其是 中裂解液先用酚/氯仿去除蛋白质,再分别用 遗传学方面的研究日渐深入,在此基础上产 乙醇或异丙醇沉淀DNA。甲酰胺法是利用 生的基因工程技术已在医药、农业、畜牧业等 高浓度的甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结 领域获得广泛应用。研究和应用DNA的基 合,然后利用透析来处理DNA样品。这些 础是提取纯化结构完整的DNA,为此针对不 经典方法获得的DNA纯度很高,能够满足 同来源的DNA建立了不同的提取纯化方各种试验的要求,但操作繁琐,用时长,且所 法。本文对从陆生动物、植物、微生物以及海 用试剂具有一定的毒性。 洋生物来源的DNA的传统提取方法及近年 1.2玻璃棒缠绕法 来诸多的改良方法进行综述。 该法用盐酸胍裂解细胞,然后将细胞裂 解物小心铺在离心管中的乙醇上,用一个带 1动物来源的DNA的提取 钩的或前端为U形的玻璃棒在这两层液体 1.1经典提取方法 的交界面慢慢搅动,沉淀出的胶状DNA缠 酚抽提法、异丙醇沉淀法以
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