针箍菌的生活史.pdfVIP

菌 物 学 报 23 （3 ）：381~387, 2004 Mycosystema 针箍菌的生活史 史立平 李 玉* (沈阳师范大学生物系 沈阳 110034 ; 吉林农业大学菌物研究所 长春 130118) 摘 要:利用基物和燕麦-琼脂技术研究了针箍菌的个体发育过程，在燕麦琼脂培养基上完成了从 孢子到孢子的生活史。结果表明，生活史包括单核的黏变形体或游动胞、多核的营养体原质团以 及孢子形成阶段。琼脂培养基获得的针箍菌孢子与野生型相似，并具有可育性。 关键词: 黏菌，燕麦琼脂培养，基物培养，孢子形成，原质团 中图分类号：Q939.96 文献标识码：A 文章编号：1672-6472 （2004 ）03-0381-0387 真黏菌兼有动物和真菌的特征（Ashworth Dee,1975 ），在真核生物中属于一个相对独立的 类群。迄今为止，国外有关黏菌研究的报道中，研究分类与生态的较多，而研究个体发育则较少。 国内尚无关于黏菌生活史的报道（史立平和李玉，2003 ）。 针箍菌Physarella oblonga Peck 属绒泡菌目、绒泡菌科、针箍菌属。子实体为孢囊型，群生， 具柄。孢囊圆桶状，一般垂头，向内深凹入呈杯状，径可达 1mm，全高可达 3mm 。柄呈圆或扁 的桶形，中空，红色，半透明；基质层不明显；孢子成堆时暗黑色。针箍菌属于广布种，在世界 各地均有分布。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 供试菌种: 供试菌种来自野外采集：作者于2000 年10 月、2001 年和2002 年5 月至10 月， 在吉林省长春吉林农大校区、净月潭；吉林市蛟河、永吉罩大鸡山；通化集安、敦化、抚松等地 采集得到黏菌的子实体或原质团，并作记录。 依据黏菌子实体及孢子等特征进行鉴定。 1.1.2 主要设备: 超镜工作台、医用蒸汽消毒锅、离心机、真空干燥箱、人工气候箱、实体及显微 成像系统、日本Hitachi S-570 扫描电镜等。 1.2 方法 1.2.1 野外采集: 方法如前所述。 1.2.2 基物培养: 基物培养（El-Hage et al., 2000, Schnittler Novozhilov, 2000, Schnittler Stephenson, 2000 ）是在实验室中人为模拟野外生活条件的黏菌培养方法。具体方法如下：将培养皿底部垫滤 纸，（先经高压灭菌）上放培养的基物，用无菌蒸馏水浸泡基物培养若干小时，使其渗透，倾去多 余的水，放在保湿透气的培养箱内。一般室温即可。保持基物和滤纸潮湿而无积水。每批基物可 培养1~2 个月。每天查看一遍。子实体在7~ 14d 内出现。 1.2.3 扫描电镜技术（SEM）: 于Hitachi S-570 扫描电镜下观察超微结构。双面胶黏贴于样台上， 国家自然科学基金资助项目） *通讯作者 收原稿日期：2004-0 1-08 ，收修改稿日期：2004-03-05 382 菌 物 学 报 23 卷 将2 个成熟子实体牢固置于双面胶上，其中的1 个子实体在解剖镜下剥开上半部囊被而使孢子暴 露。经离子溅射仪喷金后上镜观察，同时拍照。 1.2.4 悬滴培养: 悬滴培养液：蒸馏水、基物的稀煎汁等。 将黏菌孢子置于盖玻片（24 ×28mm ）中央，滴一滴悬滴培养液，轻轻混匀。凹玻片（单列 双孔）孔边缘涂医用凡士林，将盖玻片迅速翻转，并盖在凹玻片之上。 1.2.5 燕麦琼脂培养: 参照Hok（1954）和Hosoda（1980）的方法，将 90mm 的培养皿于165℃ 灭菌1h。100ml 蒸馏水中加燕麦粉3g，煮沸 1h ，用纱布过滤，定容至100 ml 。将2g 琼脂条洗 净、剪碎 ，溶于燕麦粉溶液，过滤，分装在三角瓶中 121℃灭菌20m ，无菌条件下倒入玻璃培 养皿（90mm ）中，打孔（8mm），26℃放置24h 。将子实体粉碎，置于1ml 离心管中。加0.01%HgCl 1ml。1000rpm 离心3m，倾去上部溶液。用无菌水重复离心2 次，倾去上部溶液。孢子置于燕麦 琼