Anza限制酶克隆系统提供了多种平末端克隆方案剖析.PDFVIP

白皮书 Anza 限制酶克隆系统 Anza 限制酶克隆系统提供了多种平末端 克隆方案 接至载体 生成目标克隆 摘要 ， 。 我们可以利用多种重组 方法将目的 导入环状质粒载体 DNA DNA 可以利用多种方法制备插入片段 用于平末端克隆 这些方法通 ， ， 中 传统克隆相对简单且成本较低 目前仍然是最常用的方法 。 ， ， 常需要先对目的 序列进行 扩增 如果使用未磷酸化的 DNA PCR 。 该方法需要使用限制性内切酶及其他 修饰酶。 DNA Invitrogen™ 引物扩增 ，则必须使用 多核苷酸激酶 处理平末端 GOI T4 (PNK) 限制酶克隆系统提供了 种限制酶和 种 修饰酶， Anza™ 128 5 DNA 扩增片段 增加 磷酸基团 以方便连接至制备好的去磷 PCR ， 5- ， 采用独特的统一缓冲液以及快速 方便使用的酶切实验方案 进 、 ， 酸化载体 基于 的 聚合酶可在扩增片段上留下 突 。 Taq DNA 3-A 一步简化了传统克隆实验流程 我们在此介绍了 限制酶克 。 Anza 出端 连接前需要去除 如果使用基于 的 聚合酶 可以 ， 。 Taq DNA ， 隆系统的特点以及如何使用Invitrogen™ Anza™ 限制性内切酶 使用具有 → 核酸外切酶活性的 聚合酶和 处 3 5 T4 DNA T4 PNK 和 修饰酶试剂盒将平末端目的基因 克隆至 (REases) DNA (GOI) 理扩增片段 去除 突出端 增加 磷酸基团 有时插入片段需 ， 3- ， 5- 。 载体中 我们的结果证明了 Invitrogen™ pZErO™-2 。 Invitrogen™ 要连接至多个含有粘性末端或平末端的载体 首先使用内切酶 。 系统的简便 快速和高效 并提供了将这些试剂整合至标 Anza™ 、 ， 处理扩增的 片段 形成 磷酸化的粘性末端 用于定向克 DNA ， 5- ， 准克隆流程的最佳方法范例。 隆 然后使用 聚合酶或 片段处理扩