二酰甘油酰基转移酶选读.ppt

化合物 6 和 7 对小鼠肝微粒体中 DGAT1 具有竞争性抑制作用，IC 50 分别为 50.3 和 194 μmol·L-1 化合物 8为一种非竞争性的 DGAT1 抑制剂， 其对小鼠肝微粒体中 DGAT1 的 IC 50为 8.0 μmol · L-1，该类化合物可能是甘草中对 2 型糖尿病有治疗效果的活性成分之一。 丹参为一种常见中药，被广泛用于治疗冠心病和心绞痛。近来研究显示，丹参中多种成分也具有 DGAT1 抑制活性，其中隐丹参酮和 9， 10 - 二氢丹参酮Ⅰ对小鼠肝微粒体中 DGAT1 的 IC 50 分别为 10. 5 和 11. 1 μmol·L－1 丹参酮 Ⅱ A 和丹参酮 Ⅰ 的DGAT1 抑制活性则较低(IC 50 在 250 μmol·L－1 以上) 经构效关系分析可知，二氢呋喃环对于丹参酮的 DGAT 抑制活性至关重要，当其被替换为呋喃环时，该类化合物的活性将大大降低。 （9） （10） 2、合成类 DGAT 抑制剂 自 2004 年以来陆续报道的小分子 DGAT 抑制剂，大多是以 DGAT1 为作用靶点。 Tularik 公司和日本烟草公司是小分子 DGAT1 抑制剂研究的先驱者，在其合作开发的嘧啶并［ 4， 5- b］ ［ 1， 4］ 噁嗪类化合物中，化合物 11 对 DGAT1 的 IC 50 达 0. 015 mmol·L-1  （11） 构效关系分析显示，化合物噁嗪环中的碳氮双键为化合物保持活性的重要部分，当其还原为单键时，化合物活性降低为原活性的 1/10 噁嗪环和苯环可能需处在同一平面才能使化合物发挥更好的药效 将嘧啶环中氮原子替换为碳原子可使化合物活性降低至1/100 ～1/10 该化合物存在一些缺陷，如光稳定性较差；且可在体内代谢为乙酰葡萄糖苷，可能会与体内某些蛋白形成共价加成物而导致特异质反应。 阿斯利康公司开发的 DGAT1 抑制剂 AZD - 7687 的多剂量递增的Ⅰ期临床研究也于 2011年 4 月完成; 诺华公司启动了一项为期 12 周、有 720 名 2 型糖尿病患者参加的随机、双盲、平行的Ⅱ期临床研究，以评价其开发的 DGAT1 抑制剂 LCQ - 908 分别与二甲双胍或西他列汀合用治疗糖尿病的效果。是目前唯一一个进入Ⅱ期临床研究的 DGAT1 抑制剂。 DGAT 作为药物靶点尚存在一些问题： 而 DGAT1 并非人体内合成三酰甘油的主要酶，因此，对于非脂肪摄入过量导致的肥胖可能存在药效不佳的问题。 曾有报道指出，DGAT1 基因敲除小鼠的皮脂腺分泌功能发生紊乱 DGAT1 基因敲除的雌性小鼠乳腺分泌功能缺失，无法正常哺乳。 DGAT2 基因敲除小鼠体内的三酰甘油合成量比正常小鼠减少了 70 % ～ 90 % 目前前已发现，利用反义寡核苷酸技术对小鼠体内某些器官 (肝) 中的 DGAT2 进行抑制，则可安全有效地改善小鼠的脂肪肝和胰岛素抵抗症状。 因此，寻找作用较为 “温和”、且具有一定靶向性的 DGAT2 抑制剂也是开发肥胖及 2 型糖尿病治疗药物的研发思路之一。 谢谢大家！ 二酰甘油酰基转移酶(DGAT) 目录 一、概述 二、DGAT作用机制及分类 三、DGAT的功能研究 四、DGAT的活性检测 五、DGAT抑制剂 一、概述 二酰基甘油酰基转移酶（ Diacylgycerol acyltransferase，DGAT） DGAT 早在 1956 年就曾被报道过，但其研究进展缓慢，原因在于DGAT为一种细胞膜内嵌蛋白而难于纯化。 20世纪90年代，DGAT1 和 DGAT2 基因先后被发现，其蛋白也随后被发现，为DGAT功能的深入研究创造了条件。 2型糖尿病，也称非胰岛素依赖型糖尿病；其主要诱因是不良生活方式所导致的肥胖和超重。 肥胖是一种体内脂肪过度积累的病理状态，同时也是其他许多疾病的诱发因素，现已成为一个全球性的健康问题。 过量的三酰甘油被脂肪细胞吸收是导致肥胖的主要原因。 DGAT是甘油三酯合成的限速酶，它的主要作用机制是使二酰甘油加上脂肪酸酰基形成甘油三酯。 DGAT是催化三酰甘油最终合成的关键酶。 DGAT基因缺失或酶活受抑时，可作为肥胖和糖尿病治疗药物的靶点。 二、DGAT 作用机制及分类 DGAT 是一种微粒体酶，该酶与脂肪代谢及脂类在组织中的沉积有密切关系，它能够催化二酰甘油与酰基辅酶 A 的共价结合，从而形成甘油三酯。 作用机制 三酰甘油 可在非脂肪细胞(如肝脏、 肌肉和胰岛细胞)中积蓄而产生脂毒性， 这也是导致胰岛素抵抗的重要机制之一。 体内合成途径 3-磷酸甘油途径 单酰甘油途径 GPAT:磷酸甘油酰基转移酶; AGPA