降钙素基因相关肽对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞指南.PDFVIP

圭垦重重氢鱼垫堕堂!!!!笙!旦蔓!!鲞笙i塑垦坠也堡坐鱼堡丛生!坚型!!!!!!!!：!；：堕!：! ·263· ·论著· 降钙素基因相关肽对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞 增殖及蛋白激酶Ca信号途径的调控作用 付红敏 李利 王亚军 汤春辉 米弘瑛许峰 匡凤梧 【摘要】 目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧暴露下肺泡I型上皮细胞(AECI)的促增殖作 用及其蛋白激酶Ca／核转录因子一KB(PKCa／NF—xB)信号途径的调控机制。方法将原代分离培养的孕21d胎 鼠AEC1分为空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组。空气组和高氧组分别在21％o：或85％ 0：中暴露24h；高氧CGRP组在高氧处理前加入CGRP，高氧CGRP拮抗剂组同时加入CGRP和CGRP受 体拮抗剂CGRP8—37。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和不同细胞周期 细胞比例；蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测胞膜和胞质PKCa的表达；激光共聚焦检测NF—KBp65 的细胞核表达。结果 高氧组Go／G1期细胞比例明显高于空气组[(80．652士6．253)％比(45．825± 0．01)。CGRP干预可提高高氧暴露AECI的增殖能力[(94．813±6．102)％]，使S期和G2／M期细胞增多 (0．63±0．10比1．00士0．09)，而NF—KBp65的荧光强度高于空气组(22．98±2．20比14．54土2．35)；高氧 CGRP组胞膜与胞质PKCa比值(1．41士0．23)及核内NF—KBp65荧光强度(35．38士3．37)均高于高氧组 可促进高氧暴露下AECI的生长增殖；PKCa参与了CGRP对细胞作用的信号传递，而NF—KB是PKCa的下 游分子之一，仅部分执行PKCa的效应。 【关键词】肺泡I型上皮细胞；蛋白激酶C； 核转录因子一KB； 降钙素基因相关肽； 高氧 The effectsofcalcitonin on Ialveolar cell proliferation-promotinggene—relatedpeptidetype epithelial to mediated Ca FU kinase Li，WANG exposedhyperoxia byprotein pathwayHang—min+，LI Ya—jun， TANG of First Chun-hui，MIHong—ying，XUFeng，KUANGFeng一硼“．‘DepartmentPediatrics，the Yu，zrlan of 650032，Yunnan，China People’sHospital Province，Kunming author：XU CorrespondingFeng，Email：xufen99899@yahoo．corn．c，2 of 1 To theeffectscalcitonin [Abstract]Objectiveexplore gene—relatedpeptide(CGRP)ontype alveolar to todeterminewhetherthemechanismismediated epithelialcell(AECⅡ)exposedhyperoxia，and