基于Amplex UltraRed和HRP的新型葡萄糖生物传感器.pptVIP

基于Amplex UltraRed和HRP的新型葡萄糖生物传感器 汇报人：陈泽川 ＋ ＋ 01 02 03 背景及原理 实验内容 结果与讨论 目录 01 背景及原理 ONE 通过电化学的方法，使葡萄糖在氧化酶催化溶液中发生氧化反应，并经过HRP-辣根过氧化酶催化形成恩能够被检测到的物质 葡萄糖传感器 HRP-辣根过氧化物酶 过氧化物酶一般源于辣根（一种植物），所以叫做辣根过氧化物酶；是临床检验试剂中的常用酶 几丁质经过脱乙酰作用得到的； 具有很好的生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性； 壳聚糖 背景 葡萄糖是生命活动中不可缺少的一种物质，它参与人体的新陈代谢，提供能量来源，补充血糖，强心利尿，还能促进肝的解毒作用； 我国是成年人糖尿病患者占全球糖尿病患者的1/4，目前只能通过控制血糖浓度的方法来控制发病率，继续快速、稳定、精确的血糖浓度测定方法 葡萄糖与糖尿病 应糖尿病人群数量的飞速增长，对葡萄糖浓度的监控技术也在飞速的发展；本文试图利用壳聚糖用于基于酶的生物传感器的研发，以期望研究出一种新型葡萄糖生物传感器。 葡萄糖传感器的研究 背景 葡萄糖生物传感器的4大指标 1.高灵敏度 2.良好的抗干扰能力 3.简单且稳定 4,响应时间短 原理 葡萄糖氧化酶催化溶液中葡萄糖发生氧化反应生成H2O2；溶液中的辣根过氧化酶催化生成的H2O2分解成羟基自由基，羟基自由基不可逆的氧化非活性的壳聚糖生成水和具有电活性的resorufin（7-羟基-3H-吩噁-3-嗪酮），resorufin在大约-0.1V发生一个可逆的电子还原反应从而生成可被检测到的产物； 葡萄糖生物传感器 壳聚糖有很好的生物相容性，对酶有很好的亲和力 壳聚糖和葡萄糖氧化酶固定在电极表面 02 实验内容 TWO 实验内容 仪器与试剂 试剂：壳聚糖、HRP、过氧化氢、葡萄糖、多巴胺、抗坏血酸等 仪器：CHI832B电化学分析仪 1.将玻碳电极分别用金相砂纸，氧化铝粉末打磨抛光成镜面之后用二次去离子水冲洗，然后在硝酸，氢氧化钠溶液丙酮以及去离子水中超声波洗涤5min 2.称取0.1g壳聚糖置于小烧杯中，加入1%的醋酸溶液10ml搅拌2h，得到粘稠的壳聚糖溶液，取等量的葡萄糖氧化酶溶液混合，去2微升滴加到玻碳电极上，自然晾干 01 葡萄糖传感器 的制备 02 03 结果与讨论 THREE 极致无岸， 向天而歌 壳聚糖和HRP对H2O2的电催化性质研究 壳聚糖和HRP催化H2O2的催化机理探讨 新型GOD/CHIT葡萄糖传感器的选择性 新型 葡萄糖传感器对葡萄糖检测的重现性和稳定性 1.壳聚糖和HRP对H2O2的电催化性质研究 用循环伏安法考察壳聚糖和HRP对双氧水的催化性质； a：0.2U/mlHRP b：0.2U/mlHRP+H2O2 c：0.2U/mlHRP+50μmol 壳聚糖 d：0.2U/mlHRP+50μmol 壳聚糖+H2O2 H2O2=底物 壳聚糖=催化剂 1.壳聚糖和HRP对H2O2的电催化性质研究 运用i-t法考察壳聚糖和HRP对H2O2的催化作用。 在右图中，由于还原峰电流是根据传感器在不同时间点进行测定，所以出现类似与波段形状，但总体而言，还原峰电流还是与H2O2浓度呈现良好的线性关系。