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Bruker Confidential 质谱法(MASS SPECTROMETRY) 常见的质量分析器 反射模式下TOF的分辨率高于线性模式 仪器校准 校正方程: m/z = A t2 + B t + C 内标法: 样品与标准品点在同一靶点 外标法: 样品与标准品点在不同靶点 Reasons for Peak broadening or poor Resolution! 初始能量不均 初始能量不均导致谱峰变宽，分辨率降低 如何补偿初始能量的不均？ 延时提取产生聚焦效果 延时提取产生聚焦效果 延时提取产生聚焦效果 Reflectron 低质量端的大量背景信号 抑制基质峰的方法 降压法 基质吸收激光的能量，并将部分能量传递给样品。 帮助样品离子化。 样品厚度不均匀的后果 Linear TOF PSD碎片被反射镜分离,但不能一次全部被检测 MALDI TOF-TOF 的原理：LIFT ?高灵敏度，低至 fmol ?软电离方式，主要产生单电荷离子，谱图易解析 ?容忍少量杂质：PBS 20 mM Tris buffer 50 mM Detergents 0.1 % SDS 0.01 % ?反射式TOF具有高分辨率 ? 线性TOF分析器可分析大分子量的物质 Matrix Analyte Sinapinic acid proteins/glycos/polar polymers DHB proteins/glycos/sugars/polar polymers super-DHB proteins/glycos/sugars/polar polymers alpha-cyano peptides HABA peptides/proteins THAP1 oligonucleotides HPA1 oligonucleotides Dithranol2 nonpolar polymers IAA2 nonpolar polymers Additives: 1) ammonium citrate 2) Ag-TFA 基质的选择 点样方法： Dried Droplet matrix analyte sample solution sample deposition Analyte dispersed throughout matrix crystals Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTM Uacc A B UB UA A B UB UA m/z m/z E=1-2kV/mm Example: Dx=50mm Dtof = 3-4ns or Dm=0.27Da at 2465Da A B B A AnchorChip 普通靶 疏水涂层 疏水涂层靶 疏水涂层靶 普通靶 AnchorChip 2 mm 600 um 杂质对样品信号的抑制 [m/z] 1000 1500 2000 2500 3000 3500 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 [Abs. Int. *10^ 3] [m/z] 1000 1500 2000 2500 3000 3500 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 [Abs. Int. *10^ 3] Casein digest with 200 mM KCl and 0.1% Tween 20 Casein digest after clean up Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTM 样品之间的信号抑制 1300 1800 2300 m/z 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 5500 6000 6500 a.i. Equimolar mixtures may produce unequal peak intensities. Competition for charge affe