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第01章基因组结构与功能

(三)质粒的复制 质粒能够独立于细胞的染色质DNA而进行复制; 质粒的一个复制单位称为一个复制子,包括DNA复制起点及其相关的调控元件; 质粒的复制由复制子和调节因子的相互作用启动。 质粒的复制主要由质粒的四个遗传控制系统决定。 (四)质粒性质 可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个细菌细胞中,使两个细胞都成为带有质粒的细胞;质粒转移时,它可以单独转移,也可以携带着染色体(片段)一起进行转移,所以它可成为基因工程的载体。 Virus 病毒是一类体积微小、结构简单、只含一种类型核酸、专性细胞内寄生、以复制方式增殖的非细胞型微生物。 (2)染色体的二级结构—螺线管 六个核小体缠绕一圈形成的中空性管,外径30nm,内径10nm,H1位于螺线管内侧。 (3)染色体的三级结构—超螺线管 (4)染色体的四级结构—染色单体 在上述结构形成过程中,DNA长度被逐级压缩。从DNA到染色单体,DNA长度压缩了8000~10000倍。 PIR * 核小体 螺线管 超螺线管 染色单体 压缩7倍 压缩6倍 压缩40倍 压缩5倍 意义: 将近2m长的DNA分子容纳于直径只有5微米的细胞核中。 影响解链,影响与蛋白质的相互作用,调控基因表达。 双螺旋DNA (一)真核生物染色体基因组一般特征  1、真核生物的基因组比较庞大; 2、线性双链DNA和二倍体; 3、真核细胞基因转录产物为单顺反子。一个结构基因经过转录生成一个mRNA分子,再翻译生成一种蛋白质;    4. 存在重复序列,重复次数可达百万次 以上; 5. 基因组中非编码区域多于编码区; 6. 大部分基因含有内含子,因此,基因 是不连续的(断裂基因,split gene)。   单一序列(unique sequence):又称单拷贝序列或低度重复序列,指基因组中只有1个或少数几个(2~3个)拷贝的序列。多为编码蛋白质的结构基因。 1、单一序列 (二)重复序列 高度重复序列在基因组中重复频率高,可达百万(106)以上 高度重复顺序又按其结构特点分为三种 反向重复序列 卫星DNA 较复杂的重复单位组成的重复顺序 2、高度重复序列 high repeated sequence (1)倒位(反向)重复序列 reverse repeated sequence   这种重复顺序约占人基因组的5% 反向重复序列由两个相同顺序的互补拷贝在同一DNA链上反向排列而成。 变性后再复性时,同一条链内的互补的拷贝可以形成链内碱基配对,形成发夹式或“+”字形结构 倒位(反向)重复序列 倒位重复(即两个互补拷贝)间可有一到几个核苷酸的间隔,也可以没有间隔。没有间隔的又称回文结构(palimdrome),回文结构约占所有倒位重复的三分之一。 5`AAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTT3` 3`TTTGGTGGCGACCATCGCCACCAAA5` 5`AAACCACCGCTAGCGGTGGTTT3`3`TTTGGTGGCGATCGCCACCAAA5` 回文结构 (2)卫星DNA(satellite DNA) 重复顺序:由2-100bp组成重复单位,重复单位成串排列而成。由于这类序列的碱基组成不同于其他部分,可用等密度梯度离心法将其与主体DNA分开,因而称为卫星DNA(或随体DNA) 在人基因组中,卫星DNA约占 5-6% 根据卫星DNA的长度可分为卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA。 (1).复制调控系统: 控制质粒的拷贝数 复制起始点(ori) Rep基因: Rep蛋白结合于ori, 促进复制,过量可抑制复制 Cop基因: 抑制复制 (2).分配系统: 使质粒在细菌分裂时精确分配到子细 胞中. (3).细胞分裂抑制系统: 控制细胞分裂,使细胞分裂与质粒复制协调 (4).位点特异重组系统: 多聚体 单体 (细菌内) (分裂时) 1、质粒的转移: 2、质粒具有选择性标记 质粒有抗药性基因、营养缺陷型基因、抗重金属盐基因等多种选择性标记 可接合质粒如 F 因子(F factor)     3、质粒的不相容性 概念:利用相同复制和维持系统的质粒不能 共存于同一个细胞内。 举例: pMB1和colEⅠ是两个密切相关的复制 调控系统,带有pMB1和colEⅠ复制调 控系

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