kFluor594Click-iTEU流式检测试剂盒解析.PDFVIP

kFluor594 Click-iT EU 流式检测试剂盒 说明书修订日期 产品编号：KGAU332-10/KGAU332-20/KGAU332-50 Store at -20℃, protected from light For Research Use Only 一、组份及保存温度 组份 KGAU332-10 KGAU332-20 KGAU332-50 保存温度 稳定性 组份A ：10mM EU 0.4ml 2×0.4ml 2×1ml -20℃ 组份B ：kFluor594-azide 100μl 200μl 0.5ml -20℃，避光 按指定稳 定保存可 组份C ：CuSO4 0.4ml 0.8ml 2×1ml 2-8℃ 有效放置 一年。 组份D ：Click-iT EU 缓冲液添加物 100mg 200mg 500mg 2-8℃ 规格: 针对6孔板培养的细胞，KGAU332-10可以提供至少10管反应的量；KGAU332-20可以提供20管反应的量， KGAU332-50是可以提供50管反应的大包装。 注意：不同器皿培养的细胞所对应的具体反应体系用量可参考附录表1.EU培养基及染色反应液的使用量参考 荧光光谱数据: kFluor594-azide: 590/617nm. 其他所需试剂  10mM PBS,pH7.2-7.6  固定液（3.7%甲醛in PBS ）  促渗试剂（10X PBS, 1% saponin,0.09% NaN3 ）  1% BSA in PBS ，pH7.4  去离子水 Click-iT EU流式检测试剂盒 Page 1 二、产品介绍 细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。最精确的检测细胞增殖方法是BrdU法。 EU法检测试剂盒是brdu方法的革命性突破。EU （5-溴-2-尿嘧啶）试剂盒是一种嘧啶类似物，可以在核酸合成期整合入 核酸链。EU法检测是基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。 本试剂盒中，EU试剂含有炔烃，而kFluor594染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EU标记增殖快速有效，易于使用。只 需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EU。标准化的戊二醛固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞，而 brdu方法则需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，从而方便BrdU抗体结合。 EU流式检测工作流程 EU孵育细胞 收集细胞 可选：样本处理 细胞固定与促渗 可选：抗体孵育或其他细胞染色固定 检测EU 流式分析 Click-iT EU流式检测试剂盒 Page 2 三