三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子论文.docVIP

　　三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子论文 .freel in mice odel of CCl4 induced liver fibrosis ice and they 1evel of TGFβ1 and IL1 ined and observed tissue patho1ogy.ResultsIt significantly decreased 1evel of TGFβ1 and IL1 in serum ent，and the 1iver fibrosis proved.Conclusion PNS has reversal effects on mice ay be correlated level of TGFβl and IL1. Key l加橄榄油（化学醇）80 ml混合而成。四氯化碳由重庆东方试剂厂出品，橄榄油由上海化学试剂站分装厂出品。 1.4 主要仪器酶标仪（MK3型，Labxystem Dragon公司生产）；SHZ82型水浴箱为江苏省太仓医疗器械厂产品。 2 方法 2.1造模与分组实验共设为3组：空白对照组(对照组，n=12)：颈部皮下注射橄榄油5 ml/kg，5 d 1次，正常饮水，饲与全价颗粒饲料。肝纤维化模型组(模型组，n=12)：颈部皮下注射20%的CCl4橄榄油溶液5 ml/kg，1次/5 d，直到实验结束，共持续6周［5］，正常饮水，饲与全价颗粒饲料。三七治疗组(治疗组，n=12)：在预实验取得最佳剂量后，造模的同时给予三七总皂苷皮下注射，30 mg/kg,1次/d，其余同肝纤维化模型组。 2.2 观察指标及其测定方法 2.2.1 对小鼠一般情况及体重的观察每天观察小鼠的一般症状，饮食变化，行为及毛发变化。 2.2.2 TGFβ1、ILl的检测 实验结束后，各组小鼠断头取血，分离出血清，酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清中TGFβ1及IL1的水平，具体操作均按试剂盒说明。 2.2.3 病理形态学观察 常规HE染色观察肝组织学变化，将肝纤维化分为0～4级［6］,0级：无纤维化；I级：纤维结缔组织仅局限于汇管区或汇管区扩大，有向小许发展的趋势；Ⅱ级：纤维结缔组织增生进入肝小叶2/3并有与工级同样的改变；Ⅲ级：纤维结缔组织进入肝小叶达中央静脉周围；Ⅳ级：纤维结缔组织在全小叶多处弥漫性增生，假小叶形成，并有与Ⅲ级同样的改变。 2.3统计学处理肝纤维化分级结果比较采用等级资料的秩和检验，两均数比较采用t检验。P 0.05为有统计学意义。 3 结果 3.1 小鼠一般情况 对照组处死前均存活，每只体重增加(9.6±3.4)g，模型组死亡4只，至6周末处死前，每只体重增加(2.6±2.0)g，显著低于对照组(P＜0.01)。三七治疗组实验中死亡1只，每只体重增加(6.6±2.8)g，显著高于模型组(P 0.01)。死亡者未列入统计。 3.2 各组小鼠肝组织病理学变化模型组肝细胞有较广泛的点状坏死，伴炎症细胞浸润，肝细胞增生较为明显，汇管区结缔组织增生。治疗组，肝组织切片检测可见修复的肝细胞索，炎症细胞浸润轻于模型组。见表1。表1 各组小鼠肝纤维化病理学分级及评分（略） 3.3各组小鼠血清中TGFβ1，IL1的水平模型组小鼠血清TGFβ1，IL1显著地高于对照组，治疗组小鼠血清TGFβ1，IL1显著地低于模型组。见表2。表2各组小鼠血清中TGFβ1，IL1测定结果 （略） 4 讨论 本研究以CCl4复制小鼠肝纤维化动物模型，使肝细胞发生变性坏死，通过炎症肝脏结缔组织增生，分割肝小叶，最后导致肝硬变。肝纤维化的实质是由于胶原和其他细胞外基质(ECM)的合成与降解失衡，导致ECM在肝内过量沉积［6］。 ECM的沉积和降解间的平衡由多种细胞因子调控，其中TGFβ1及IL1的调控作用尤为关键。TGFβ1在肝纤维化中的主要作用是促进ECM合成并抑制其降解，也有间接促HSC增殖作用［3］。肝纤维化患者TGFβ1水平升高，其升高与肝纤维化严重程度一致［4］。IL1主要由单核巨噬细胞分泌，作用于人的贮脂细胞、纤维母细胞、增加胶原合成， Dolar等［7］检查了43例慢性病毒性肝炎患者和肝硬化患者血清II1水平，发现其与肝纤维化程度呈正相关。Aanstssalos等还发现IL1可加强TGFβ1的合成与释放，诱导粘附分子及其受体表达。根据中医辨证，结缔组织增生性疾病(包括肝纤维化和肝硬化)与血瘀证相关，而活血化瘀药物对此类疾病有独特的功效。 在肝纤维化的治疗中，目前以活血化瘀及益气活血法应用得最为广泛。三七是经典的止血活血良药。临床观察发现，三七有利胆退黄、降酶等作用，可提高慢性肝病患者的血浆白蛋白［7］。 药理研究证实，三七对动物实验性急性肝损伤有明显的防