BaF3细胞株BaF3CellLine.PDFVIP

天 CAT#:26-680 常温运输，后续处理见手 净 册 沙 系 列 BaF3 细胞株 BaF3 Cell Line 使用手册V 1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@ 产品及特点 1、产品名称：BaF3 细胞；小鼠原B 细胞株 2、产品规格：1 瓶 3、生长特性：悬浮 4、培养体系：RPMI-1640+10% FBS+10 ng/mL LM3 5、冻存条件：90%FBS + 10%DMSO 规格及成分 成 份 编 号 包 装 BaF3 细胞 26-680 1 瓶 使用手册 1 份 运输及保存 常温运输，收到后的后续处理见使用方法 自备试剂 完全培养基、PBS、0.25%胰蛋白酶消化液 使用方法 1. 请您在收到细胞时，首先观察培养瓶是否完好，培养液是否外渗，培养液是 否混浊，建议最好对细胞状态拍照留存。如发现有瓶破、渗漏、培养液混浊 等问题，请在收到细胞后立即与我们联系。 2 2. 收到细胞后如无异常情况：请取出 25 cm 培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶消 毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过 80%汇合度时，可将 瓶装的完全培养液移入废液缸中，原瓶保留 6-8 mL 完全培养液，悬浮细胞 需离心处理，放入37℃，5%CO 细胞培养箱中培养；超过80%汇合度时， 2 根据情况传代或冻存，具体步骤见细胞培养。 3. 细胞培养： 1) 复苏细胞：将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻， 加入5 mL 培养基混合均匀。在 1000 rpm/min 下离心5 分钟，弃去上 清液，补加 1-2 mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中 培养过夜（或将细胞悬液加入6cm 皿中，加入约6 mL 培养基，培养过 夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代：如果细胞密度达80-90% ，即可进行传代培养。 A. 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： a) 弃去培养上清，用不含钙镁离子的PBS 润洗细胞 1-2 次。 b) 加2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱 中孵育 1-3 分钟左右，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若 细胞大部分回缩变圆、透亮、轻拍瓶壁呈流沙样脱落，则快速 拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5 mL 以上培养液终止消化。 c) 轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在