黔北麻羊繁殖力候选基因的研究.pdfVIP

贵州大学2010届硕士研究生论文 谨以此文献给我的父母及妹妹，感谢他们一直以来的教 育和关心，这份恩情让我永生难忘！ —任珍珍 iii 黔北麻羊繁殖力候选基因的研究 目 录 目 录 目目 录录 摘 要VIII 前 言1 第一章 文 献 综 述3 1 贵州黔北麻羊品种简介3 1.1 主产区自然生态条件3 1.2 品种的形成及数量3 1.3 体型外貌4 1.4 体尺体重4 1.5 屠宰测定4 1.6 繁殖性能5 2 分子标记5 2.1DNA 分子标记技术种类6 2.1.1 限制性片段长度多态性6 2.1.2 随机引物扩增多态性DNA7 2.1.3 扩增片段长度多态性8 2.1.4 微卫星8 2.2 候选基因的研究9 3GDF9 和BMP15 基因研究进展9 3.1 GDF9 基因结构和定位9 3.2 GDF9 基因表达10 3.3 GDF9 基因与动物繁殖性状的关系11 3.4 BMP15 基因结构和定位12 3.5 BMP15 基因表达12 3.6 BMP15 基因与动物繁殖性状的关系13 4LHΒ和ESR基因研究进展13 4.1 LHΒ基因结构和定位13 4.2 各种动物的促黄体素Β亚基基因的研究概况14 4.2.1 绵羊促黄体素β亚基基因14 4.2.2 大鼠促黄体素β亚基基因14 4.2.3 猪促黄体素β亚基基因14 4.3 ESR 基因结构和定位15 4.4 ESR 基因表达15 4.5 ESR 基因与动物繁殖性状的关系16 5本研究目的与意义16 第二章 材 料 与 方 法18 1 实验材料18 1.1 实验样品18 1.2 实验仪器18 1.3 实验主要试剂19 1.4 实验主要试剂和溶液的配制19 1.5 主要分析工具软件20 2 实验方法20 2.1 采集样品20 2.2 羊基因组DNA的提取20 2.3DNA浓度和纯度的检测21 2.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测21 2.3.2 紫外分光光度法21 iv 贵州大学2010届硕士研究生论文 2.4 引物22 2.4.1 引物设计与合成22 2.4.2 引物溶液的稀释23 2.5PCR 反应23 2.5.1PCR 反应体系23 2.5.2PCR 反应条件23 2.6PCR 产物检测24 2.7PCR 产物纯化24 2.8 纯化回收产物的检测及测序25 2.9 数据分析25 2.9.1 测序结果进行序列校正25 2.9.2 对校正后的结构进行序列比对25 2.9.3 试验数据运用SPSS16.0、EXCEL 等软件分析处理。25 第三章 结 果 与 分 析28 1羊基因组DNA的提取检测28 2PCR产物扩增检测28 3 测序结果29 3.1GDF9基因29 3.2BMP15基因30 3.3LHΒ基因30 3.4ESR 基因31 4变异位点和突变的碱基类型32