微生物ATP提取方法与其在微波灭菌效果快速评价中的应用研究.pdfVIP

第29卷第2期 食 品 与 生 物 技 术 学报 Vo1．29 NO．2 2O1O年 3月 JournalofFoodScienceandBiotechnology M ar． 2O1O 文章编号：1673—1689(2010)O2一O172—05 微生物 ATP提取方法及其在微波灭菌效果 快速评价中的应用研究 叶菁 ， 王周平 ， 乐国伟， 施用晖 (江南大学 食 品学院，江苏 无锡 214122) 摘 要 ：本文对ATP发光技术中微生物 ATP提取方法进行 了优化研究，通过对不同提取剂提取 效率 的比较 ，发现苯扎溴铵提取效果好 ，并且无需稀释 ，能真 实体现微 生物细胞 内的 ATP水平。 通过对苯扎 溴铵提取时间和提取浓度 的优化 ，结果显示采用体积分数 为 0．05 苯扎溴铵溶液与 茵液混合 3～4min，即可将细胞 内的ATP最大限度地释放 出来。将该提取方法与ATP生物发光 反应体 系偶联，实现 了对微波灭菌效果的快速评价 ，在短时间内即可得到可靠结果。试验比较 了 不同微波功率和微波时间的灭菌效果 ，实验结果表 明，大肠杆菌 ATCC25922在用2450MHz650 w微波照射 60S时可被 完全杀灭，而金黄 色葡萄球菌 ATCC25923则需 70S才能被杀灭。当用 2450MHz微波 同样处理 6OS时，650w 即可杀 灭大肠杆 菌 ATCC25922，而金 黄 色葡萄球 菌 ATCC25923则需 700w 才可被完全杀灭 。 关键词：生物发光；苯扎溴铵 ；微波灭菌；快速检测 中图分类号：TL271．5 文献标识码 ：A OptimizationandapplicationofATP BioluminescenceSystem in theRapidEvaluationofM icrowaveSterilization YEJing， WANG Zhou—ping ， LEGuo—wei， SHIYong—hui (SchoolofFoodScienceandEngineering，JiangnanUniversity，Wuxi214122，China) Abstract：In thismanuscript，the extraction method ofmicroorganism ArP used in bioluminescence techniqueswerestudied．According to comparetheextractresultsofdifferentextractants，itwas foundthatthatbenzalkonium bromide (BAB) iS thebestextractant to extractallofATP microorganism cells．Theextraction conditions including the extractantconcentration and the extactiontimeweredeterminedandlistedasfollows：0．05 BAB mixingwithbacteriacellsfor 3— 4 min． The finding wasapplied to rapidly evaluatethe effectofmicrowave sterilization couplingwithbioluminescenttechnologyandthereliableresultscanbeobtainedwithinashort time．Accordingtothesterilizationeffectofdifferentmicrowavepowerandsterilizationtime，we foundthatE．ColiATCC25922canbecompletelyexterminatedirrediated by2450M Hz650W microwavefor6O Sbut70