19PCR实验室暖通设计(第三版).pptx

PCR实验室暖通设计探讨 韩磊峰、郑若 2014.10 一.PCR实验概述二.PCR实验室平面布局三.PCR实验室各房间主要功能和设备配置四.PCR实验室空调通风设计五.总结 一.PCR实验概述 PCR实验是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明了具有划时代意义的PCR技术。  [1] 实验目的 实验目的 PCR(Polymerase Chain Reaction)即 聚合酶链式反应，又称无细胞分子克隆系统或体外酶促基因扩增法。是分子生物学研究和实验的常规方法，也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。 PCR实验又称临床基因扩增实验，通过将病毒体内所含的基因进行扩增，即将微量的DNA大幅增加，以测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。 [1] 基本原理 二.PCR实验室平面布局    [2] 四个区域 试剂 配置室 样品 处理室 核酸 扩增室 产物 分析室 缓冲 缓冲 缓冲 缓冲 PCR专用走道 四个区域   上海第三人民医院 [2] 平面布局 四个区域 上海复旦大学附属华山医院 [2] 平面布局 平面布局 四个区域  分散式 各实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。 各实验之间不易相互干扰。 除各实验室自身做好防护，防止外界环境对实验造成影响外，其它无特殊条件要求。 [2] 布局形式 平面布局 四个区域  组合式 完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置，形成集中、独立的实验区域。 每个实验室应设置独立缓冲间、实验室间应设置带消毒装置的传递窗。 [2] 布局形式 三.PCR实验室的主要功能和设备配置   [3] 试剂储存和准备区 主要功能 试剂的制备和贮存 试剂的分装 主反应混合液的制备 设备配置 2-8℃和-15℃冰箱 混匀器 微量加样器（覆盖1-1000ul） 移动紫外灯（近工作台面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、 耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品   [3] 标本制备区 主要功能 核酸(RNA、DNA)提取、贮存 扩增反应管的制作 设备配置 2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 高速台式冷冻离心机 混匀器 水浴箱或加热模块 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面） 生物安全柜 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理 的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 如需处理大分子DNA，应具有超声波水浴仪   [3] 扩增反应混合物配置和扩增区 主要功能 DNA或cDNA扩增 设备配置 核酸扩增仪 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理 的离心管和加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品   [3] 扩增产物分析区 主要功能 扩增片段的测定 设备配置 视检验方法不同而定。基本仪器设备如下： 微量加样器（覆盖1-1000ul） 可移动紫外灯（近工作台面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心） 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 四.PCR实验室空调通风设计 国家关于PCR实验室建设及管理的现行技术规范和标准*《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》 卫生部*《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》*《临床基因扩增检验实验室工作规范》*《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》卫办医政发 【2010】194号*《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 *《生物安全实验室建筑技术规范》 GB50346-2011*《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008*《洁净厂房设计规范》GB50073—2013*《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》WS233-2002 中华人民共和国卫生部 [4] 设计依据 设计依据 [4] 《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 “对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。” 设