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尿中,δ--ala的测定实验报告 尿中ALA测定实验报告 08 检疫 HapyWu 尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的测定 一、实验目的 学会用乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛比色法测定尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的含量，从而了解铅吸收和铅中毒的诊断。 二、实验原理 在PH为4.6及温度为100℃的条件下，δ—ALA与乙酰乙酸乙酶缩合生成吡咯化合物。此化合物用乙酸乙酯提取，并与显示剂（对二甲氨基苯甲醛）作用生成红色化合物，根据颜色深浅进行比色定量。 三、实验步骤 1. 标准曲线的绘制 取具赛比色管10ml6支，按下表配置标准色列： A.各管中加入2ml乙酸缓冲液，0.4ml乙酰乙酸乙酯，混匀，于沸水中加热10分钟，取出冷至室温。 B.各管加入4ml 乙酸乙酯，加塞振摇1分钟，离心5分钟、取出静置分层。 C.各取乙酸乙酯提取液2ml于另外6支管中，各管加入2ml显色剂，加塞振摇，静置10分钟。 D.用分光光度计（波长554），以零管作参比，测其吸光度。根据ALA浓度与吸光度的关系绘制标准曲线。 2.尿样测定 A.预先测定尿液比重，测得尿样比重为1.010。 B.分别取1ml尿样于两支上述一样的管内，各加入水1ml，乙酸缓冲液2ml,混匀。其一为样品管，另一为空白管。向样品管中家兔0.4ml乙酰乙酸乙酯，空白管中加入0.4乙酸缓冲液，充分混匀，同时置沸水浴中加热10分钟，取出冷至室温。 C.按标曲绘制的B~D进行，以乙酸乙酯作参比，进行比色定量。 四．实验结果与计算 1.标准曲线绘制 管号 ALA含量 （ug) 吸光度A 0 0 0 1 1 0.054 2 3 0.152 3 5 0.242 4 7 0.288 5 10 0.479 2.尿样结果 空白管为0.022，样品管为0.110。 带入标准曲线查得样品管中ALA含量为1.83ug。 根据尿样比重为1.010，在正常范围内，故 尿中ALA（mg/L)=样品管中ALA含量（ug) =1.83mg/L 五．实验结论 根据铅实验室检测指标值，尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ALA)的诊断值为8mg/L，因此本实验所用的尿样样品未超标。 六．实验讨论 1.进行比色定量时，为什么样品测定时用乙酸乙酯作参比？ 原因是标准曲线用的是应用液，可以用零管参比，而测定管中的最大容积为乙酸乙酯，为了最大限度的消除背景吸收等带来的误差，因此选择乙酸乙酯作为参比。 2.若鸟样比重不在正常的范围内，测的结果应如何计算 此时应先进行校正，采用公式： 尿中ALA（mmol/L）=样品管含量（ug） * 1.030-1.000 * 0.00761（尿样）尿比重-1.000 3.实验过程中应注意哪些 在处理数据时，应返回检测一下数据结果是否在此方法的线性范围内，否则会影响实验的准确度；同时因为所用的试剂为有机溶剂，易分解，最好采用近期产品，显色剂宜新鲜配制；取样时应准确量取；离心过程中应注意配平；加入显色剂后应在半个小时内完成比色。 篇二：生物化学答案 一 选择题 1. 糖是生物体维持生命活动提供能量的（B）（南京师范大学2001年） A.次要来源 B.主要来源 C.唯一来源 D.重要来源 2. 纤维素与半纤维素的最终水解产物是（B）（南京师范大学2000年） A.杂合多糖B.葡萄糖 C.直链淀粉D.支链淀粉 3. 下列那个糖是酮糖（A）（中科院1997年） A．D-果糖B. D-半乳糖 C.乳糖D.蔗糖 4. 下列哪个糖不是还原糖（D）（清华大学2002年） A. D-果糖 B. D- 半乳糖 C.乳糖D.蔗糖 5. 分子式为C5H10O5的开链醛糖有多少个可能的异构体（C）（中科院1996） A.2B.4C.8 D.6 6. 下列那种糖不能生成糖殺（C） A. 葡萄糖B. 果糖 C.蔗糖D. 乳糖 二 填空题 1. 人血液中含量最丰富的糖是_葡萄糖__，肝脏中含量最丰富的糖是_肝糖原_，肌肉中含量最丰富的糖是_肌糖原_。 2. 蔗糖是由一分子_α-D葡萄糖_和一分子_β-D果糖_组成的，他们之间通过_αβ-1,2_糖苷键相连。 3.生物体内常见的双糖有_麦芽糖_，_蔗糖_，和_乳糖_。 三 名词解释 1. 构象 分子中各个原子核基团在三维空间的排列和分布。 2. 构型 在立体异构中取代原子或基团在空间的取向。 3 变旋现象当一种旋光异构体，如葡萄糖溶于水中转变为几种不同的旋光异构体的平衡混合物，此时所发生的旋光变化现象。 四 简答题 1. 五只试剂瓶中分别装的是核糖，葡萄糖，果糖，蔗糖和淀粉溶液，但不知哪知瓶装的 是那种溶液，可用什么化学方法