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第三章动物实验基本技术
主要内容 实验动物的抓取 实验动物的给药方法 动物体液及样品的采集 重点难点 各种实验动物的抓取 各种给药途径的动作要领 各种实验动物体液的采集 青蛙的抓取 重点难点 各种实验动物的抓取 各种给药途径的动作要领 各种实验动物体液的采集 麻醉前准备: 禁食8~12h,防止呕吐,可饮水 根据实验部位和种类,给动物脱毛。 犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减少动物紧张,减少支气管分泌 B 、氯胺酮:为白色结晶粉末,溶于水,微溶于乙醇,pH3.5-5.5,是一种镇痛麻醉剂。 氯胺酮主要是阻断大脑联络径路和丘脑反射到大脑皮质各部分的路径,多用于犬、猫和啮齿类动物的麻醉。 优点:静脉或肌肉给药后,很快起到麻醉作用,但维持时间短(10-20min); 缺点:有升血压、加快心率的副作用,还可引起动物呕吐。 C 、水合氯醛:作用特点和巴比妥类药物相似,能起到全身麻醉作用,是一种安全有效地镇静催眠药。 缺点是由于其麻醉量与中毒量很接近,所以安全范围小,此外副作用是对皮肤和黏膜有较强的刺激作用。 (2)局部麻醉剂 A、普鲁卡因:为氨苯甲酸酯,是无刺激性的局部麻醉剂。因其对皮肤和黏膜的穿透力较弱,故需要注射给药才能产生局部麻醉。 优点:麻醉速度快,注射后1-3分钟内就可产生麻醉,可维持30-45分钟; 缺点:因其可使血管轻度舒张,易被吸收入血而失去药效,副作用为在大量药物被吸收后,表现出中枢神经系统先兴奋后抑制。 B、 利多卡因:常用于表面、浸润、传导麻醉和硬脊膜外腔麻醉。 化学结构与普鲁卡因不同,它的穿透力和效力比普鲁卡因强两倍,作用时间也较长。 C 、地卡因:地卡因化学结构与普鲁卡因相似,能穿透黏膜,作用迅速,1-3分钟发生作用,持续60-90分钟。局部麻醉作用比普鲁卡因强10倍,吸收后的毒性作用也相应加强。 (二)麻醉方法 1 、全身麻醉 (1) 吸入麻醉 将含有乙醚的棉球放入容器中,将动物放入,并盖紧盖子让 乙醚挥发,观察动物的行为。开始动物出现兴奋,继而出现抑制,自行倒下;当动物角膜反射迟钝、肌肉紧张度降低时,即可取出动物。 本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉,也可用于较大的动物。 (2) 非吸入麻醉 非挥发性麻醉是一种既简单方便,又能是动物很快进入麻醉期,而无明显兴奋期的方法,常采用注射方法进行。 静脉注射、肌肉注射多用于较大动物,如兔、猫、猪、犬等;而腹腔注射多用于较小的动物,如小鼠、大鼠、豚鼠等。 由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别,所以在腹腔和静脉麻醉时,一定要控制药物的浓度和注射量 。 2 、局部麻醉 局部麻醉虽然在动物实验中用途不是很广泛,但猫、犬等大动物短时间内实验中可能会使用局部麻醉的方法。 局部麻醉时用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导,产生局部性麻醉区。 局部麻醉的特点是动物可保持清醒状态,对重要器官功能干扰轻微,麻醉并发症少。 局部麻醉常用的方法是表面麻醉、浸润麻醉、区域阻滞麻醉以及传导麻醉等,其中浸润麻醉应用最多。 浸润麻醉是将麻醉药物注射于皮肤、肌下组织或手术深部组织,以阻断用药局部的神经传导,使痛觉消失。 3. 麻醉效果的观察 动物的麻醉效果直接影响实验的进行和实验结果。在麻醉过程中必须善于判断麻醉程度,观察麻醉效果。判断麻醉程度的指标有: (1) 呼吸:加快或不规则,则麻醉过浅,可再追加麻醉,若呼吸由不规则转变为规则且平稳,说明已达到麻醉深度。若动物呼吸变慢,说明麻醉过深,动物有生命危险。 (2)反射活动:角膜反射灵敏,则麻醉过浅;反射迟钝,麻醉程度适宜;反射消失,伴瞳孔散大,则麻醉过深。 (3)肌张力:亢进,麻醉过浅;全身肌肉松弛,麻醉合适。 (4)皮肤夹捏反应:麻醉过程中可随时用止血钳或有齿镊夹捏动物皮肤,若反应灵敏,则麻醉过浅;若反应消失,则麻醉程度合适。 4.使用全身麻醉剂的注意事项 给动物施行麻醉术时,一定要注意方法的可靠性,根据不同的动物选择合适的方法,特别是较贵重的大型动物。 (1)麻醉剂的用量,除参照一般标准外,还应考虑个体对药物的耐受性不同,而且体重与所需剂量的关系也并不是绝对成正比的。一般说,衰弱和过胖的动物,其单位体重所需剂量较小,在使用麻醉剂
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