肝胆感染性疾病病原菌分布和耐药状况分析.pdfVIP

贵阳医学院 2012 届硕士研究生论文 前 言 肝胆感染性疾病是临床中常见的一组感染性疾病。其中如肝脓肿，急性化脓 [1] 性胆管炎，重症胰腺炎等属于临床重症 。抗生素的应用在肝胆感染时是一项重 [2] 要的治疗措施 。由于肝脏、胆道、胰腺在解剖学及功能上密切相关，而胆道感 染常合并结石或狭窄，梗阻可加重感染。细菌耐药株的增多也增加了治疗的难度， 故在肝胆危重感染性疾病中合理使用抗菌药非常重要[3][4][5] 。 病原菌的抗药过程和抗生素的应用联系非常紧密，缺一不可[6][7][8] 。1942 年， 青霉素刚发现且还在应用试验阶段，大肠埃希菌里的青霉素酶即被 Abraha 和 Cha [9] 发现 。从此之后，Newton 在 1957 年发现了头孢菌素酶，病原菌的抗药问题慢 慢被重视起来[10][11] 。 抗生素的应用可以有效地控制感染的发生发展[12][13]，但由于抗生素的滥用， 使细菌的耐药性变得越来越严重，这是大多数医生必须重视的临床问题[14][15][16] 。 为了遏止抗生素滥用现象，卫生部近年来采取了一系列措施[17][18] 。如严格 落实抗生素分级管理制度[19]，严格规范医师抗生素处方权限资格管理、加强抗生 素耐药菌的微生物及药敏试验监测等[20][21][22] 。 由于抗生素的滥用和经验性地使用抗生素，出现细菌的耐药性，从而使抗生 素使用的种类不断改变及使用剂量不断增加[23]，结果导致抗生素滥用与耐药细菌 之间的恶性循环[24][25] 。为了进一步掌握我院肝胆外科危重感染性疾病病原菌的主 要种类及其耐药情况我们进行了此项研究[26][27] 。 - 3 - 贵阳医学院 2012 届硕士研究生论文 材料与方法 1 材料 1.1 标本来源： 查阅我院细菌室及医院感染管理科 2009 年 1 月-2011 年 12 月肝胆外科送检 病原菌及药敏结果进行回顾性分析。2011 年 10 月从细菌室收集的 30 株铜绿假 单胞菌进行 PCR 检测 5 种耐药基因。结果判定依据临床实验室标准化协会(CLSI) 标准，质控菌株为大肠埃希菌 ATCC 25922，肺炎克雷伯菌ATCC 700603，铜绿假 单胞菌 ATCC 27853。 1.2 药品和试剂： Takara Tag 酶 大连维达生物公司 2000 DNA Marker 大连维达生物公司 蛋白酶 K 大连维达生物公司 DNA 扩增序列引物 上海顺义工程公司 DNA 提取试剂盒 Axy2gen 公司 DNA 凝胶纯化试剂盒 Axy2gen 公司 聚合酶链反应(PCR)试剂盒 中山大学达安科技有限责任公司 1.3 主要仪器设备： microscan walkaway 40 细菌自动 Dade MicroScan 公司 鉴定及药敏分析仪 HC-3018R 高速冷冻离心机 科大创新实验仪器有限公司 PCR 扩增仪 日本TAKARA 公司 Dyy-6c 型电泳仪 北京六一仪器厂 Ultrospec 紫外分光光度计 美国 GE 公司 凝 胶 成 像 分 析 系 统 Kodark 美国柯达公司 Elctrophoresis Documentation and Analysis Sy