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博格隆(上海)生物技术有限公司 021 Bestarose Fast Flow 说明书 1、简介 Bestarose 4 Fast Flow 和Bestarose 6 Fast Flow 凝胶过滤介质分别由4%和6%高度交联 的琼脂糖制成,不同的琼脂糖浓度赋予介质不同的孔径。 Bestarose Fast Flow 系列介质具有良好的物理稳定性和色谱性能,可以满足高通量工业 Bestarose Fast Flow 生产的需要,介质刚性良好,可耐受较高的流速,并且具有良好的分辨率。 凝胶过滤介质可快速处理大体积样品,这使它成为规模生产中的理想选择。Bestarose Fast Flow凝胶过滤填料易于操作,填充柱可以在位清洗和消毒。 2、性质  成分 Bestarose 4 FF 4%高度交联琼脂糖 Bestarose 6 FF 6%高度交联琼脂糖  平均颗粒大小 90μm (平均) 45-165μm (分布范围)  球状蛋白分离范围 (Mr) 4 7 Bestarose 4 FF 6×10 -2×10 4 6 Bestarose 6 FF 1×10 -4×10  pH 稳定性 3-13 (工作) ,2-14 (CIP,短期)  流速范围 Bestarose 4 FF 150-250cm/h (0.1Mpa BXK 50/30 柱高25cm 室温25℃) Bestarose 6 FF 200-400cm/h (0.1Mpa BXK 50/30 柱高25cm 室温25℃)  化学稳定性 在所有常用水溶性溶液中稳定:如 1M NaOH,70%乙醇,30%异丙醇,6M 盐酸胍, 8M 尿素,1%SDS 等 3、介质应用 DNA 纯化过程去除RNA DNA 疫苗纯化工艺中,大肠杆菌发酵的DNA 质粒菌体经细胞裂解,离心,浓缩后通 过Bestarose 6FF 完成DNA 和RNA 的初步分离。 层析柱:BXK50/30 柱床高度:25cm 流速:60cm/h 上样量:130ml 1 博格隆(上海)生物技术有限公司 021 Bestarose 6FF 纯化DNA 谱图 4、再生和清洗 每次纯化过程完成后需要再生介质,通常使用高浓度无机盐如 1-2MNaCl 缓冲液清 洗3-5 倍柱体积(Column Volume ,以下简称CV),去除可逆结合的杂质。 层析介质在使用3-5 个循环后需要进行在位清洗,帮助介质恢复良好的性能。 通常使用无机盐、酸、碱或有机溶剂进行清洗 对于不同类型的杂质和污染物建议清洗条件如下: 4. 1 离子键结合蛋白的去除:先用3-5CV 2M NaCl 清洗,后用3-5CV 纯水冲洗。 4.2 疏水性结合蛋白的去除:先用2CV 1M NaOH 清洗,浸泡2h ,后用5-10CV 纯水 冲洗。 4.3 脂蛋白和脂类物质的去除:先用3-5CV 的70% 乙醇或30%异丙醇清洗,后用3-5CV 纯水冲洗。 注:在位清洗过程中流速可选择30-60cm/h 。 清洗后如需立即使用,用平衡缓冲液冲洗3-5CV 即可。 5、储存 20% 乙醇, 4-30℃。 2

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