3第三章 抗体.pptVIP

第三章 抗体(antibody) 掌握免疫球蛋白、抗体的概念、结构、分类和功能。 熟悉免疫球蛋白的抗原性，各类免疫球蛋白的生物学活性和抗体的制备。 3.1 抗体的发现及其特征3.1.1 抗体的发现 　 第一种抗体的发现: 1890年德国学者Behring和日本学者北里： 白喉杆菌（G＋）外毒素 动物 血清中发现中和外毒素的组分——抗毒素。 含有抗体的血清——免疫血清(抗血清) 抗原和抗体的概念的建立： 又发现了杀菌素、溶菌素、凝集素、沉淀素等因子； 将血清中这种具有特异性反应的组分称为抗体（antibody，Ab）； 能刺激机体产生抗体的物质称为抗原（antigen，Ag）。 3．1．2 抗体的理化性质 　 1.抗体是球蛋白　　 20世纪40年代，Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，获得免疫血清。加入相应抗原吸收除去抗体，将除去抗体的血清进行电泳图谱分析，发现丙种球蛋白（γ-G）组分明显减少。 ——证明抗体活性存在于丙种球蛋白内。 抗体由异质性球蛋白组成 对不同免疫血清的电泳分析，超速离心分析和分子量测定，发现大部分抗体活性存在于γ球蛋白内； 小部分抗体活性可存在于β球蛋白内，分别被命名为7S β球蛋白分子（β2A，16万）、19Sβ2巨球蛋白分子（β2M，90万）。 2.免疫球蛋白 　　血清中现已发现有五类免疫球蛋白分子 60年代初提出将具有抗体活性的球蛋白称为免疫球蛋白分子（Ig）。 γ球蛋白——IgG，β2M——IgM，而β2A——IgA。又相继发现IgE和IgD。 抗体与免疫球蛋白的区别： 抗体着重于生物学活性，即能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白，如抗布鲁氏菌抗体、抗抗体、抗核抗体。 免疫球蛋白着重于化学特征，指具有抗体活性或化学结构上与抗体结构相似的球蛋白 抗体是免疫球蛋白，但免疫球蛋白不一定都是抗体（多发性骨髓瘤患者体内所产生的免疫球蛋白并不都有抗体活性）。　　 抗体主要存在血液中和其他体液（组织液）和外分泌液中——分泌型Ig（sIg）； 免疫球蛋白也可作为抗原受体，存在于B细胞膜上——膜型Ig（mIg） 3．2 免疫球蛋白的分子结构与功能 3．2．1 免疫球蛋白的基本结构 酶解免疫球蛋白对血清IgG研究： R. Porter 木瓜蛋白酶 2Fab片断、 1Fc片断。 A.Nisonoff 胃蛋白酶 1F(ab’)2片断（具 有双价活性）、Fc’小片断。 G.Edelman 2-巯基乙醇 2H链、2L链 Ig分子基本结构：由左右对称的四个肽链组成（二条轻链和二条重链）轻链与重链之间由二硫键连接成Ig单体，分为N端，C端。（一）轻链和重链 　　1．轻链（light chain，L链） 结构：214AA，不含碳水化合物，24KD，有两个由链内二硫键组成的环肽； 分型：根据恒定区抗原性（构型差异）分：κ与λ2型，一种抗体分子只有一种L链， λ还可分亚型（小鼠3，人4）　　 2．重链（heavy chain，H链）　　结构：450-550AA，55-75KD，含糖数量不同，4-5个链内二硫键； 分类：根据恒定区抗原性，分5类：μ、γ、α、δ、ε链，还可分亚类。 不同的H链与L链（κ或λ）组成完整5类Ig：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE 。　 （二）可变区和恒定区 1．可变区（Variable region，V区）　　AA差异大。 L链N端 1/2处（VL）108-111AA， H链N端1/5-1/4处（VH）118AA。 V区各有一个肽环，包括65-75AA。　　　 V区可分为 骨架区（FR）：AA组成和排列 顺序不易变化的区域 高变区（HVR）：AA组成和排列 顺序更易变化的区域 VL的HVR在24-34，50-56，89-97