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芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术.pdf
农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12 (3): 347~348
·研究简报·
芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术*
1,2 1 1
金万梅 巩振辉 ** 吕元红
(1.西北农林科技大学园艺学院,杨凌712100;2.北京市农林科学院林业果树研究所,北京 100093 )
关键词:植株原位真空渗入法;遗传转化;根癌农杆菌;芥菜
Technique of -mediated Gene Transformation
by Vacuum Infiltration in
1, 2 1 1
JIN Wan-Mei GONG Zhen-Hui ** LV Yuan-Hong
(1.College of Horticulture, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100,China; 2.Institute of Forestry and Pomology,
Beij ing Academy of Agriculture and Forestry Science, Beijing 100093,China)
vacuum infiltration; genetic transformation;
[1]
Bechtold 建立了植株原位真空渗入遗传转化方法。此 1/2MS 培养基加0, 15, 20, 25, 30 和35 g/mL 潮霉素。
[2] [3]
后,许多学者在拟南芥 和芸薹属一些作物 上进行了尝试, 以未经处理的芥菜种子作为对照。在确定了适宜的潮霉素筛
尚未对芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的因素进行 选浓度后,对不同处理的种子进行筛选,统计抗性苗,计算转
研究。本实验以芥菜为试材,旨在建立和优化芥菜植株原位 化率。
真空渗入高效遗传转化技术,为芥菜乃至芸薹属作物遗传转 1.4 抗性 株的分子检测
化提供方法与技术。 芥菜植物基因组DNA 的提取和PCR 检测参考文献[4] ;
使用 DIG-DNA 标记系统对抗性植株的 Southern 杂交分析。
1 材料和方法
取 4 株PCR 扩增阳性植株的总DNA 和未转化植株总DNA
1.1 植物材料
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