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芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术.pdf

农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2004,12 (3): 347~348 ·研究简报· 芥菜植株原位真空渗入遗传转化技术* 1,2 1 1 金万梅 巩振辉 ** 吕元红 (1.西北农林科技大学园艺学院,杨凌712100;2.北京市农林科学院林业果树研究所,北京 100093 ) 关键词:植株原位真空渗入法;遗传转化;根癌农杆菌;芥菜 Technique of -mediated Gene Transformation by Vacuum Infiltration in 1, 2 1 1 JIN Wan-Mei GONG Zhen-Hui ** LV Yuan-Hong (1.College of Horticulture, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100,China; 2.Institute of Forestry and Pomology, Beij ing Academy of Agriculture and Forestry Science, Beijing 100093,China) vacuum infiltration; genetic transformation; [1] Bechtold 建立了植株原位真空渗入遗传转化方法。此 1/2MS 培养基加0, 15, 20, 25, 30 和35 g/mL 潮霉素。 [2] [3] 后,许多学者在拟南芥 和芸薹属一些作物 上进行了尝试, 以未经处理的芥菜种子作为对照。在确定了适宜的潮霉素筛 尚未对芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的因素进行 选浓度后,对不同处理的种子进行筛选,统计抗性苗,计算转 研究。本实验以芥菜为试材,旨在建立和优化芥菜植株原位 化率。 真空渗入高效遗传转化技术,为芥菜乃至芸薹属作物遗传转 1.4 抗性 株的分子检测 化提供方法与技术。 芥菜植物基因组DNA 的提取和PCR 检测参考文献[4] ; 使用 DIG-DNA 标记系统对抗性植株的 Southern 杂交分析。 1 材料和方法 取 4 株PCR 扩增阳性植株的总DNA 和未转化植株总DNA 1.1 植物材料

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