细胞培养技术复习题.docVIP

名词解释： 二倍体细胞株：具有二倍体染色体数的细胞株。 世代：指细胞经过一次分裂后完成后至下次分裂的过程。 细胞富集：当细胞分离纯化并不完全彻底，培养物中能达到以某种细胞为主（占绝大多数）的程度。 组织工程：组织工程是应用生命科学和工程学的原则及方法，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下的组织结构与功能关系的基础上，研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态的生物替代物的一门新兴学科。 Density inhibition: 密度抑制，由于细胞密度过大，培养液营养耗尽、代谢产物过多和生存空间消失所引起细胞增殖的抑制现象。 消化液：在原代细胞培养和细胞传代时，都要用消化液，最常用的是胰蛋白酶和二乙烯四乙酸二钠（EDTA），其次是一些特殊的组织细胞培养用的各型胶原酶。在原代细胞培养中，使用消化液从组织块中分离（散）出单个的细胞；在进行细胞传代时，消化液使细胞脱离生长表面并离散成单个细胞。 清洁液：是一种不含磨蚀性物质，能迅速清除物品上污垢,分解脏污，令物品透明亮如的清洁用品。通过某个转化过程形成的，常由于染色体断裂变成异倍体，失去正常细胞特点，而获得无限增殖能力。转化细胞系具有长期培养，倍增时间短，对培养条件和生长因子等要求较低的特点，适于大规模工业化生产。B淋巴细胞杂交瘤技术，即将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，以建立可以分泌单一性抗体的杂交瘤细胞系的技术。 问答： 简述体外培养细胞的主要生物学特点。 答：体外培养细胞的生物学特点：（1）去分化：体外培养,分化特征逐渐减弱，使细胞结构与功能上的“可塑性”增大 （2）贴壁铺展：粘附于固相表面是锚定依赖性细胞生命活动的基本要求。细胞被接种到培养器皿内以后首先要发生粘附，是细胞培养以后能否成功的第一步.提供什么样的生长表面是细胞能否成功粘附的主要因素。铺展是进行生命活动的一种基本的生长特点或生长行为铺展状况制约细胞的分裂增殖活动过程，细胞先由圆形变为圆饼形(放射状铺展细胞)逐渐铺开伸展成为扁平的极性细胞。极性细胞就是各种有机体细胞是在体外的特征性细胞形态（3）接触抑制和密度依赖性生长抑制：细胞生长有密度抑制，血清可降低密度抑制，转化细胞可降低密度抑制 简述成体干细胞的定义与特点。 答：成体干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞。成体干细胞存在于机体的各种组织器官中。成年个体组织中的成体干细胞在正常情况下大多处于休眠状态，在病理状态或在外因诱导下可以表现出不同程度的再生和更新能力。1、天然培养基：最初的体外细胞培养，均采用天然培养基。其主要取自动物体液或从动物组织中分离提取。天然培养基（液）的种类很多，包括生物性体液（如血清、血浆）、组织浸液（胚胎浸液）、水解乳蛋白等。 优点：营养丰富，培养效果良好； 缺点：成分复杂，来源受限，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析，易发生支原体污染。 2、合成培养基：研究者模拟、借鉴细胞在体内生存生长所需物质的种类和数量，设计出类似体内环境而适宜细胞在体外生存的各种培养基。 优点：（1）标准化生产，组成成分及含量明确便于精密地测定培养的细胞与培养液内物质变化的情况。 （2）便于控制和调整实验设计并使培养条件标准化。 （3） 合成培养液中没有不透明物质，使得培养的细胞形态清晰透明，便于观察记录。 缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 简述细胞培养污染的种类及污染的预防措施。 答：细胞污染可分为以下三类：物理性、化学性和生物性，物理污染：主要指温度、放射线、振动和辐射等。化学污染：主要指血清、培养液及试剂、水、培养用器皿和孵箱等。生物污染：主要指细菌、霉菌和酵母、支原体、病毒、细胞系交叉污染。 预防的方法：1。从物品、用品消毒灭菌着手 2。从操作者做起：（1）操作者责任心要强，要细心稳重，操作技术要熟练。进无菌室前要用肥皂洗手或用5%新洁尔灭浸泡5分钟，按规定穿隔离衣。（2）操作者动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，要常更换吸管，切勿一根吸管做到底。一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕及时收拾，保持是钥匙清洁整齐，最后用消毒水浸泡的纱布擦台面。3。早期留有充足的冻存储备，可以复苏早期冻存细胞使用。 试比较治疗性克隆与体细胞重新编程。 答：项目 治疗性克隆 体细胞重新编程 干细胞名称 ES细胞 iPS细胞 细胞来源 供者卵母细胞和患者体细胞