细胞凋亡过程中细胞骨架改变的激光共聚焦显微镜观察_吴波.pdfVIP

29 4 电 子 显 微 学 报 Vol. 29 ，No. 4 第 卷第 期 2010 8 2010-08 年 月 Journal of Chinese Electron Microscopy Society 文章编号:1000-6281 (2010)04-0361-06 细胞凋亡过程中细胞骨架改变的 激光共聚焦显微镜观察 1 1 2 1 1 ， ， ， ， 吴 波 高 清 刘 琦 石群立 孟 奎 (1. ，2. ， 210002) 南京军区南京总医院病理科 南京军区南京总医院妇产科 江苏南京 : : 。 : 摘 要 目的 了解细胞凋亡过程中细胞骨架的形态学改变 方法 应用高浓度全反式维甲酸诱导卵巢癌细胞凋 ， 。 : ， 亡 激光共聚焦显微镜观察经荧光染色的细胞微管蛋白的形态学变化 结果 凋亡早期 微管蛋白在荧光相由正常 ， ， 。 按一定方向分布的丝网状结构变成杂乱分布的网状结构 晚期呈细颗粒状分布 荧光强度随凋亡发展而逐渐变弱 : ， ， ， ， 讨论 在凋亡过程中 细胞骨架随凋亡发展出现相应的形态学改变 凋亡早期 细胞骨架在分布上出现变化 伴随细 ， ， ， 。 胞形态出现变化 凋亡晚期 细胞骨架蛋白发生降解 此时的细胞形态改变是不可逆的 : ; ; ; 关键词 细胞凋亡 微管蛋白 激光共聚焦显微镜 免疫荧光染色 中图分类号:Q2 ;Q336 文献标识码:A 24 h 1 ， 2 ～ 3 0. 25% 细胞骨架在细胞发育及其生物过程中起着相 观察 次 平均 天用 胰蛋白酶和 ， 0. 02% EDTA 。 ，1 000 r / 当重要的作用 而微管又是细胞骨架的主要成分之 消化传代 取出培养细胞 ， 、 、 min ， PBS 2 ， 一 其功能包括细胞的支架作用 细胞内运输 形成 离心 用 漂洗 遍 细胞涂片凉干后纯丙酮 、 。 ，4 ℃ 。 纺锤体 纤毛与鞭毛的运动等 细胞凋亡过程中细 固定 冰箱冷藏备用 胞形态发生一系列的改变，如细胞表面结构消失、 1. 2 试剂 、 、 ， : Tubulin- ( 脱落周围细胞群 胞质出芽 凋亡小体形成等 其本