用整体染色透明法观察油杉花粉粒的结构.pdfVIP

( ) 　第 37 卷第 2 期 郑 州 大 学 学 报 理 学 版 V o l37 N o 2 　 2005 年 6 月 . . ( . . . ) 2005 J of Zhengzhou U n iv N at Sci Ed Jun 用整体染色透明法观察油杉花粉粒的结构 1, 2 1 李国平 , 　黄群策 ( 1. 郑州大学离子束生物工程省重点实验室　郑州 450052; 2. 莆田学院环境与生命科学系　福建 莆田 351100) 摘要: 采用整体染色透明法对油杉花粉的个体发育过程进行了详细观察, 以更清楚地显示油杉单核小孢子有丝分 裂过程及其成熟花粉粒结构的特点. 结果表明, 单核小孢子经过连续 4 次有丝分裂后形成 5细胞型的成熟花粉粒; 成熟花粉由两个原叶细胞、一个不育细胞、一个精原细胞和一个管细胞组成, 其中的两个原叶细胞在花粉成熟时已 退化. 整体染色透明法制片过程简单快速, 效果较佳, 适用于裸子植物花粉个体发育过程的观察, 是值得推广的一 种观察技术; 主要关键技术在于染色、脱水和透明时间的长短. 关键词: 油杉; 花粉粒; 整体染色透明法; 植物制片 ( ) 中图分类号: Q 945; S 718　　　　　　　　　　　　　　 文章编号: 1671- 6841 2005 02- 0044- 04 0　引言 在被子植物中, 花粉粒分 2细胞型和 3细胞型; 在裸子植物中, 花粉粒所含细胞的数 目却变化比较大, [ 1 ] [ 2 ] 具 3 至几十个 , 可分松型、油杉型和银杉型 . 观察花粉个体发育过程大多采用石蜡切片法和醋酸洋红染 色压片法. 常规石蜡切片法使用药剂多, 操作繁琐, 实验周期长, 工作量大, 而且仅能观察到一个切面. 用醋酸 洋红染色压片法可快速鉴定花粉的发育时期, 但较适用于观察小孢子母细胞减数分裂过程. 油杉(K eteleeria ) [ 2 ] f ortunei 成熟花粉具 5 个细胞, 属于油杉型花粉 . 为了更清楚地观察其有丝分裂过程及主要结构特点, 应 用整体染色透明法可以清晰地显示花粉粒的内部结构, 简便易做, 效果较好. 整体染色透明不需要切片, 只经过染色、透明剂透明后便可在显微镜下观察, 是一种较石蜡制片简便的 [ 3 ] 方法. 杨弘远曾首次用此法观察了烟草的胚珠和水稻子房中的胚囊结构 . 本文用整体染色透明法进行裸子 植物花粉发育的观察, 是一种新的尝试. 1　实验部分 11　实验材料 取自福建省莆田市市郊广化寺旁树龄约为 20 年的油杉(K eteleeria f ortunei ) 野生植株雄球花. 采样时 间: 2004 年 2 月 5 日至 2004 年 3 月 10 日. 1. 2　实验器材与试剂 显微镜、解剖镜、恒温水浴锅、解剖针、镊子、吸管、凹玻片、盖玻片、烧杯和青霉素瓶等.