猪瘟病毒检测方法研究进展.pdf

2017年第47卷 ·第1期 澜 困 猪瘟病毒检测方法研究进展 诸婷婷 ，郝彦龙 ，袁小平 ，但文静 z，唐维英 。 (1．重庆市江津区油溪畜牧兽医站，重庆 402260；2．重庆市江津区动物卫生监督所，重庆 402260； 3．重庆市江津区李市畜牧兽医站，重庆 402260) 摘 要 ：猪瘟是我国猪病防治研究的重点，随着免疫学和分子生物学的发展，猪瘟病毒的检测技术由原来单纯依赖 动物接种、病毒分离和临床症状诊断发展为现在的定性定量的多种检测技术，其范围涉及免疫学实验、血清学实验和 分子生物学实验，为更好更早地控制和消灭猪瘟奠定基础。 关键词：猪瘟；猪瘟病毒；血清学；ELISA；分子生物学 中图分类号：S852．65+1文献标识码：A 文章编g-：1006—799X(2017)01-0041-02 猪瘟 (Classicalswinefever，CSF)是 由猪瘟 病毒 体 内产生抗体 中和疫苗 ，兔不产生定热型 ，反之会产 (Classicalswinefevervirus，CSFV)引起 的急性 、热性 、高 生定热型。 度接触性传染病 1】『，有 “猪霍乱”之俗称 。猪瘟呈世界性 刘旭川圈应用免疫酶组化法及兔体交互免疫两种 分布 ，危害程度高 ，给养猪业带来 了严重的经济损失 ， 方法对 155头 (份)可疑猪病料诊断猪瘟 ，检 出猪瘟 世界动物卫生组织 (OIE)将其列为 A类传染病 ，并规 138头份 ，检出率为 89．O％，两种方法检测结果完全一 定为国际重点检疫对象，我 国将其列为一类传染病 ， 致 ，证 明了以上两种方法在猪瘟诊断上 的可靠性 。兔 是我 国强制免疫 的四大疫病之一闭。 体交互试验具有经济实用 、对设备 、条件要求不高 ，诊 近年来 ，我 国猪瘟发病特点呈散发性 、温和性 、多 断结果准确 、可靠 ；缺点就是耗时较长 。 种病原混合感染 、隐性感染和亚病毒感染 ，在病理剖 1．2本动物接种试验 检上也常出现非典型猪瘟的病理变化 ，不利于临床诊 猪是 CSFV 唯一 的易感动物 ，敏感性最强 ，用 断3[1。目前 ，猪瘟的诊断方法主要包括病毒的分离与鉴 其作为试验动物诊断本病是最可靠 的方法 。但耗时 定 、血清学方法及分子生物学检测等方法 ，但 由于当 长 ，且不利 于生物安全 ，仅用于其他诊 断方法难 以 前我 国兽医基础设施设备 、技术等方面存在着较大差 确诊 时 。 异 ，兽医工作者很难找到适合各 自的猪瘟检测方法 ， 2 血清学检测 本文通过归纳总结 国内外猪瘟检测技术方法 ，旨在 寻 2．1免疫荧光试验 (FA) 找适合我 国兽 医工作者应用 的猪瘟检测技术 ，为我 国 该试验可应用于抗原 、抗体 的检测 。Robertson首 猪瘟 的综合 防控提供参考 。 次将荧光抗体运用于猪瘟病料培养物的检测 。将病死 1 动物接种试验 猪 的扁桃体 、脾 、肾、淋 巴结等器官制作成触片或冰冻 1．1兔体 交互试验 组织切片，经荧光抗体染色后 ，置荧光显微镜下观察 ， 试验 原理 ：猪瘟兔化弱毒苗对 兔有致热作用 ，而 如见到特异性绿光斑 即可判读为猪瘟 阳性 ，见到青灰 强毒在兔体 内不致热 ，不具有致病性 ，但具有抗原 色或带橙色则为阴性 。胡杰等嘲利用荧光抗体染色法 、 性 ，能产生抗体 。将病料组织液接种兔 7d后再注射 RT—PCR、CSFV 抗 原 ELISA、CSFV 糖 蛋 白 Erns 猪瘟兔化弱毒苗 ，如果病料感染猪瘟强毒 ，则在兔子 ELISA4种方法对活猪 中猪瘟