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第一篇 工业微生物和发酵工业原料 第三章 发酵工业原料及其处理 第一节 发酵工业原料的种类和成分 第二节 淀粉水解糖的制备 第三节 发酵培养基灭菌 第1节 发酵工业原料的种类和成分 1.碳源: 在发酵培养基中的含量远大于其在种子培养基中的含量。 (1)作用 提供合成细胞物质所需碳素; 提供目的产物中的碳; 合成产物的能源。 (2)种类 淀粉、淀粉水解糖、糖蜜、有机酸、低碳醇、脂质、烃类。 2.氮源: 在发酵培养基中的含量因发酵目的产物不同而不同。 目的产物是否含有氮元素。 (1)分类: 有机氮源: 豆粉、花生饼粉、棉子粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、 鱼粉等 无机氮源 氨水(液氨)、硝酸盐、铵盐。 3.无机盐: 发酵培养基的必需成分之一 主要有磷、硫、铁、Mg、Zn、Co、Cu、Mn等。 4.生长因子: 为发酵培养基必不可少的组分 对量的控制要适当,如生物素亚适量法的谷氨酸发酵。 5.前体: 概念:有些化合物被加入培养基后,能够直接在生物合成过程中结合到产物分子中去,而自身的结构并未发生太大变化,却能提高产物的产量,这类小分子物质被称为前体。 前体使用浓度要适当,浓度过高对菌体有毒害作用,一般采用 流加方式,减少一次加入量。 二、工业上常用作碳源的淀粉质原料 淀粉质原料含淀粉量高,而且来源广泛、价格便宜。 淀粉质原料及其水解液是发酵工业常用的碳源; 使用最广泛的淀粉质原料是工业淀粉、谷类、薯类; 工业淀粉有玉米淀粉、小麦淀粉、甘薯淀粉、马铃薯淀粉。 三、工业上常用作氮源的蛋白质类原料 发酵工业上常用的蛋白质原料主要有豆粉、花生饼粉、棉子粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、鱼粉等。 黄豆粉可分为:全脂黄豆粉、低脂黄豆粉和脱脂黄豆粉。 玉米浆是用亚硫酸浸泡玉米所得的浸泡液的浓缩物(固形物含量在50%以上) 蛋白胨由各种动物组织和植物水解制备;有血胨、肉胨、鱼胨、骨胨等。 酵母粉由水解啤酒酵母和面包酵母制得。 以上各种蛋白质原料均是由天然原料加工而成,成分复杂;因原料产地、加工方法、原料品种等不同,营养物质的含量也随之变化,因此对发酵有较大影响。 四、发酵培养基中的无机盐和生长因子 1.磷酸盐是某些蛋白质和核酸的组成部分; 磷酸盐有缓冲作用。 2.硫酸镁镁是许多酶的激活剂,硫为含硫蛋白提供硫源。 3.钾盐、钠盐一般以磷酸盐的形式供给 4. 微量元素以有机碳氮源时可不单独添加 5.生长因子发酵工业一般以农副产品原料提供 常用的有玉米浆、麸皮水解液、糖蜜、酵母水 解液等。 五、发酵生产的前体物质和促进剂、抑制剂 1.前体多在氨基酸、抗生素、核苷酸发酵中添加使用 2. 促进剂 作用是改善细胞环境:增加渗透性、增强氧的传递速度等。 如表面活性剂、甲醇、EDTA。 3.抑制剂 作用是抑制某些途径而使代谢向所需要产物的途径转化。 第2节 淀粉水解糖的制备 第3节 发酵培养基灭菌 纯种培养的必要性 杂菌污染所致的危害/不良后果(p73) 消耗营养成分; 分泌代谢产物,或改变培养液的某些理化性质,影响产物的提取分离; 大量繁殖的杂菌改变反应介质的pH,使生物反应发生异常; 杂菌有可能分解产物; 染菌严重者造成“倒罐”(“颗粒无收”)或污染噬菌体,导致细胞裂解,使生产失败。 二、培养基和设备的灭菌 以湿热灭菌最为普遍,效果最好。 例题 三、发酵培养基灭菌工艺 四、培养基和设备、管路灭菌的条件 参考内容 自学、了解 思考题 湿热灭菌有哪些优点? 写出微生物的热阻和培养基湿热灭菌的对数残留定律; 并解释在相同温度下,为什么某菌的k值越小说明它越耐热? 3. 培养基灭菌温度的选择: 随温度上升,微生物的死亡速率常数增加倍数要大 于培养基成分的破坏速率的增加倍数; 即杀死微生物速率的提高超过培养基成分破坏速率 的增加。 灭菌过程中,微生物被杀灭的过程中也伴随着培养基成分破坏。 达到相同灭菌效果时,温度T越高,所需的灭菌时 间t越短。因此可通过提高灭菌温度,缩短灭菌的时间。 k=Ae -(E/RT) 4. 影响培养基灭菌效果的因素: 除灭菌时间和灭菌温度外,还有: 培养基成分; 培养基的物理状态; 培养基的pH; 培养基中的微生物数量; 微生物细胞中的水分含量; 微生物细胞的菌龄; 微生物的耐热性; 空气排除情况; 搅拌; 泡沫。 实罐灭菌 空罐灭菌 连续灭菌 间歇灭菌 将培养基装入发酵罐内直接通入蒸汽进行灭菌。 1、实罐灭菌 特点:不需另外的设备,操作简便, 灭菌效果可靠,工业上广泛应用。 不足:升温和降温的时间较长。 工艺流程 装料 高压蒸汽加
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