灯盏花素对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1,Smad3表达的影响.pdfVIP

Chinese of Medicine 中国兽医杂志2016年(第52卷)第12期105 JournalVeterinary 灯盏花素对肝纤维化大鼠肝组织中 TG mad 1，S 3表达的影响 F一13 钟秀宏，张以忠，孙艳美，杨宁江，齐玲，赵东海， 郑中华，赵丽微，王爽，温娜，杨淑艳 (吉林医药学院，吉林吉林132013) 摘要：为了观察灯盏花索对肝纤维化大鼠肝组织中TGF．131和Smad3表达的影响，探讨灯盏花素抗大鼠肝纤维化的作 用机制，方法：将大鼠32只随机分为对照组、模型组、水飞蓟宾组和灯盏花素组，采用皮下注射四氯化碳(CCl。)造成大鼠 可抑制大鼠肝纤维化模型中TGF．雕和Smad3的表达，从而发挥抗肝纤维化作用。 关键词：灯盏花素；肝纤维化；肝星状细胞；Smad3；TGF一131 中图分类号：R587．1 叉献标志码：B 文章编号：0529—6005(2016)12—0105—03 前期我们研究发现灯盏花素可以抑制肝内纤 体均购自武汉博士德生物制品有限公司；ZMN-7803 维组织形成，并明显降低肝组织羟(基)脯氨酸含 型全自动组织包埋机(常州市华利电子有限公司)； RM2126型轮转式切片机(上海徕卡仪器有限公 量、MDA含量及升高SOD活力，推断抗氧化损伤可 能是灯盏花素抗肝纤维化作用机制之一-lJ。近年 司)；BA300型数码生物显微镜(中国麦克奥迪实业 来大量研究显示[HJ，肝纤维化是以细胞外基质 集团有限公司)。 (ECM)在肝脏内沉积为特征，且肝星状细胞(HSC)1．2实验动物健康Wistar大鼠(吉林大学实验 活化在肝纤维化中发挥关键作用。因此，抑制HSC 动物中心)，32只，雌雄各半，体重200±209。清洁 激活以及ECM的沉积是一个非常重要的抗肝纤维 化的靶点。目前研究发现，许多药物通过干预TGF一 (23±1)℃，相对湿度为40％。 13／Smad信号转导通路来抑制HSC激活以及ECM1．3方法 的沉积Hj，因此，本次研究拟通过建立CCl。诱导大1．3．1分组方法将大鼠适应喂养1周后，随机分 鼠肝纤维化模型，观察灯盏花素对TGF·131／Smad 为：对照组，模型组，水飞蓟宾组，灯盏花素组，每组 信号转导通路的影响，旨在进一步探讨其抗肝纤维 8只。对照组给予生理盐水，其余3组建立肝纤维 化的作用机制，以为I临床用药提供实验依据。 化模型。 1．3．2造模及给药除对照组外，其余3组大鼠背 1材料与方法 部皮下注射40％CCl。1．5 mL／kg，每周两次，首次 1．1 主要试剂与仪器灯盏花素片(昆明兴中制 剂量加倍，造成肝纤维化模型。对照组给予等体积 药有限责任公司)；水飞蓟宾胶囊(天津天士力制药 的生理盐水。其余5d水飞蓟宾和灯盏花素组分别 股份有限公司)；使用时用生理盐水溶解，配制相应 以水飞蓟宾150 mg／kg灌胃， mg／kg和灯盏花素80 浓度；四氯化碳(CCl。，天津市大茂化学试剂厂)；试对照组和模型组分别以生理盐水灌胃，各组灌胃体 验前用灭菌精制花生油配成40％浓度；CCl。(分析 积相同，连续8周，第8周末处死大鼠。 纯，西安化学试剂厂，批号：090106)；SABC盒、DAB 1．3．3标本制作取肝脏左叶，于10％中性缓冲 显色试剂盒和兔抗大鼠Smad