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中国考博辅导首选学校 生物化学与分子生物学考博专业课重点整理 （12） 三 DNA 复制的条件： 1．底物：以四种脱氧核糖核酸(deoxynucleotide triphosphate)为底物，即 dATP，dGTP，dCTP，dTTP。 2．模板 (template)：以亲代 DNA 的两股链解开后，分别作为模板进行复制。 3．引发体(primosome)和 RNA 引物(primer)：引发体由引发前体与引物酶 （primase）组装而成。引 发前体是由若干蛋白因子聚合而成的复合体；引物酶本质上是一种依赖 DNA 的RNA 聚合酶 （DDRP）。 4．DNA 聚合酶 （DNA dependent DNA polymerase, DDDP）： ⑴种类和生理功能：在原核生物中，目前发现的DNA 聚合酶有三种，分别命名为DNA 聚合酶 Ⅰ（pol Ⅰ）， DNA 聚合酶Ⅱ （pol Ⅱ），DNA 聚合酶Ⅲ （pol Ⅲ），这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。pol Ⅰ为单一肽链的大分子蛋白质，具有 5’→3’聚合酶活性 3’→5’外切酶活性和 5’→3’外切酶 的活性；其功能主要是去除引物 填补缺口以及修复损伤。pol Ⅱ具有 5’→3’聚合酶活性和 3’→ 5’外切酶活性，其功能 不明。pol Ⅲ是由十种亚基组成的不对称二聚体，具有 5’→3’聚合酶活 性和 3’→5’外切酶活性，与 DNA 复制功能有关。 在真核生物中，目前发现的DNA 聚合酶有五种。其中，参与染色体 DNA 复制的是 pol α （延长随从 链）和 pol δ （延长领头链），参与线粒体 DNA 复制的是 pol γ，pol ε与 DNA 损伤修复 校读和填 补缺口有关，pol β只在其他聚合酶无活性时才发挥作用。 ⑵DNA 复制的保真性：为了保证遗传的稳定，DNA 的复制必须具有高保真性。DNA 复制时的保真性主 要与下列因素有关：①遵守严格的碱基配对规律；②在复制时对碱基的正确选择；③对复制过程中出 现的错误及时进行校正。 5．DNA 连接酶(DNA ligase)：DNA 连接酶可催化两段 DNA 片段之间磷酸二酯键的形成，而使两段 DNA 连接起来。该酶催化的条件是：① 需一段 DNA 片段具有 3’-OH，而另一段 DNA 片段具有 5’-Pi 基； ② 未封闭的缺口位于双链 DNA 中，即其中有一条链是完整的；③ 需要消耗能量，在原核生物中由 NAD+供能，在真核生物中由ATP 供能。 6．单链 DNA 结合蛋白 （single strand binding protein, SSB）：又称螺旋反稳蛋白 （HDP）。这是一 些能够与单链 DNA 结合的蛋白质因子。其作用为：①稳定单链 DNA，便于以其为模板复制子代 DNA； ② 保护单链 DNA，避免核酸酶的降解。 7．解螺旋酶 （unwinding enzyme）：又称解链酶或 rep 蛋白，是用于解开 DNA 双链的酶蛋白，每解开 一对碱基，需消耗两分子 ATP。 （ＰＳ：The way to contact yumingkaobo TEL:si ling ling-liu liu ba-liu jiu qi ba ;QQ:wu si qi ling liu san ba liu er ） 8．拓扑异构酶(topoisomerase)：拓扑异构酶可将 DNA 双链中的一条链或两条链切断，松开超螺旋后 再将 DNA 链连接起来，从而避免出现链的缠绕。 四 DNA 生物合成过程： 1．复制的起始： ⑴预引发：①解旋解链，形成复制叉：由拓扑异构酶和解链酶作用，使 DNA 的超螺旋及双螺旋结构解 开，形成两条单链 DNA。单链 DNA 结合蛋白 （SSB）结合在单链 DNA 上，形成复制叉。DNA 复制时，局