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诊断方法的建立与临床应用.PDF
微生物学通报 AUG 20, 2008, 35(8): 1268~1272
Microbiology © 2008 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR 快速鉴别
诊断方法的建立与临床应用
刘忠华 余兴龙* 李润成 黄泽彬 廖立珊 白 霞 李 晶 向卫军 汪镇南 丁 建
( 410128)
摘 要: 根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2 基因的缺失信息, 设计了 3 条特异
性引物, 以含高致病性PRRSV Nsp2 基因的质粒pMDNSP2 及普通PRRSV VR2332 株RNA 为模
板, 建立了快速诊断高致病性PRRSV RT-PCR 方法。通过对临床组织病料的总RNA 进行不同稀
释倍数检测, 结果表明该方法能从0.265 pg 的总RNA 中检测到PRRSV 的基因, 说明敏感性高。
用该方法对猪瘟病毒(CSFV) 、Ⅱ型圆环病毒(PCV-2) 、伪狂犬病病毒(PRV) 、链球菌(Streptococcus) 、
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)和大肠杆菌(Escherichia coli) 同条件检测, 结果都为阴性。进
一步对36 份疑似高致病性PRRSV 临床组织病料细胞培养物、2 株PRRSV 商品活疫苗以及52 个
猪场所送检的 184 份临床样品进行了检测应用, 结果36 份疑似高致病性PRRSV 临床组织病料的
细胞培养物有 5 份样品为阳性且都为高致病性 PRRSV, 2 株 PRRSV 商品活疫苗为普通 PRRSV,
52 个猪场中有42 个猪场(123 份样品)呈阳性, 其中只有 1 份为普通PRRSV 。实验表明该方法能够
准确地鉴别诊断高致病性 PRRSV 和普通 PRRSV, 且具有快速、敏感和特异的特点, 具有临床实
用性。
关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病, RT-PC, 鉴别诊断
Development and Clinical Application of RT-PCR Differential
Diagnosis Method for High Virulent Porcine Reproductive
and Respiratory Syndrome
*
LIU Zhong-Hua YU Xing-Long LI Run-Cheng HUANG Ze-Bin LIAO Li-Shan
BAI Xia LI Jing XIANG Wei-Jun WANG Zhen-Nan DING Jian
(College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128)
Abstract: Based on the deletion information of high virulent PRRSV genome, 3 oligonucleotide primer
were designed and synthesized. Specific and sensitive reverse transcr
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