高级组织学课件生殖辅助技术2011级硕士研究生read1.pptVIP

ICSI过程(A) 2、取卵 在阴道B超引导下用穿刺针抽取卵泡。 3、找卵 在显微镜下将抽取的卵泡液置于器皿中迅速寻找卵冠丘复合体（OCCCS）。 4、受精（精液处理同人工授精） 卵冠丘复合体经孵育4~6h后加入适当数量的获能精子进行授精。 5、观察 16h后剥除颗粒细胞，镜下观察见两原核者为受精。继续培养36~42小时观察胚胎分裂到4~8细胞可考虑行胚胎移植。需要者也可培养到第5~6天，做囊胚移植。 5、种植 将胚胎吸入移植管中，经宫颈管将胚胎送入宫腔卧床1~3h。 6、黄体支持 移植后注射黄体酮，14天后行血β-hCG测定确定是否妊娠。 IVF 胚胎的宫内移植 移植时间：体外受精后的42-45h。现多在体外受精后3天，有时培养到5天至囊胚。 移植方法：检查是否移植进去。 代孕母亲（卫生部暂禁） 先天性子宫缺如； 因病行子宫切除术； 女方有妊娠或分娩禁忌症； 胚胎冷冻 1983年人类第一次冷冻胚胎成功 适应症 IVF或ICSI治疗中的多余胚胎； 胚胎移植发生困难； 胚胎种植前诊断等待结果； 人工赠卵等待受者子宫内膜同步； 建立胚胎库； 显微操作技术 显微受精技术：透明带部分切割、透明带下受精法及单精子卵胞浆显微注射 极体与卵裂球活检 卵浆置换、细胞核移植 辅助孵出 嵌合体技术 机械法PZD 显微操作辅助受精 ICSI受精的生物学特点： 正常受精：产生顶体反应的精子与卵膜 的融合，卵子激活以及女性、男性原核形成。 ICSI：注射时精子的顶体状态不明，而 卵与精子质膜的融合也不存在。 单精子卵浆内注射 适应症 严重少精症 弱畸精症 少弱畸精症 无精症（阻塞性及非阻塞性） 以往IVF时卵母细胞均不受精或受精率低下 其他： ICSI的禁忌症 染色体异常 严重先天畸形 ICSI 的技术操作 精子来源及处理 手淫法取精。 附睾取精:适用于阻塞性无精症。 近期有人用经皮精子抽吸法。 PESA法附睾取精 MESA及附睾精子 睾丸取精：主要适用于非阻塞性无精症，切取一小块睾丸组织的 方法获取精子或精子细胞（开放式活检）。也可用细针组织抽吸睾丸活检法。 活检枪及抽吸法睾丸取精 卵子的来源与处理 卵子一般在促超排卵后,经阴道B超介导,用16G或17G穿刺针经阴道获取。 取卵后4小时，进行去卵丘结构处理。 设备； 显微操作皿的准备； 显微注射； 精子制动与获取； 固定卵子与注射； 显微注射 设 备 ICSI示意图 ICSI操作过程 生殖辅助技术 人体解剖学与组织胚胎学系 生育是人类的基本生理功能，是人类的一种本能。 一、男性生育能力明显下降 国家计划生育委员会科学技术研究所张树成等人在论文中指出，男性精液质量随不同年代呈明显降低，而中国男性精液质量也呈明显下降趋势。 张树成等人得出了触目惊心的结论：男性精液质量明显下降。其中以精子数目的降低最为明显，降低40%以上，精子活动率降低8.4%；精子正常形态降低了7.3%；精液量降低了4.9%。 为什么男性的生育力竟下降得这么厉害？ 张树成等人认为主要是环境因素所致，即环境对生育力的影响，男性比女性更敏感。 生殖辅助技术： 人工授精 体外授精与胚胎移植 显微授精技术 配子输卵管移植 供卵 供胚胎 种植前遗传学诊断 人工授精 定义：由医师将精子注入到女性生殖道内，包括阴道内、宫颈内、宫腔内、输卵管内甚至卵泡内的精子注射。 分类： 1、按精子来源： 夫精人工授精（AIH）：artificial insemination with husband’s sperm 供精人工授精（AID）： 2、按精子的注射部位： 人工授精的适应症 一、男方因素 存在阻碍正常性交时精子进入阴道的解剖异常因素： 精神、神经因素： 中度精液异常： 二、女方因素： 存在阻碍精子在女性生殖道运行的因素：阴道与宫颈狭窄等 宫颈因素：如宫颈粘液 人工授精实施要素： 足够数量和活力的正常形态精子 正常的排卵 至少有一条输卵管通畅并且功能正常 人工授精的方法： 一、女性的准备 自然周期人工授精：将精子在最接近排卵的时间段注入女性生殖道内（基础体温测量、B超检测、尿LH测试和宫颈粘液评分） 控制性诱导排卵：FSH、hCG和黄体酮 其他准备：阴道清洁度、盆腔检查和B超、输卵管通水、输卵管造影等 二、男性精子的准备 新鲜精液： 冻存精子的准备： 精子的洗涤 方法： 早期的不清洗后穹隆注射法 宫颈周围或宫颈管内人工授精：0.5-1ml宫颈管，其余在阴道前穹隆 加用宫帽人